RNA干扰沉默iNOS基因对人胆管癌QBC939细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的:合成iNOS-siRNA并体外转染人胆管癌QBC939细胞，探讨RNA干扰沉默iNOS基因的表达对人胆管癌细胞QBC939增殖和凋亡的影响，为胆管癌的靶向治疗提供理论支持。
　　方法:应用常规方法对QBC939细胞进行培养，将其分为三组，实验组转染化学合成的iNOS-siRNA，阴性对照组转染阴性siRNA，空白对照组即正常培养的QBC939细胞。免疫组化检测iNOS基因在QBC939细胞中的表达情况，RT-PCR及Western blot检测iNOS的mRNA和蛋白水平表达，采用MTT检测细胞增殖情况，AnnexinⅤ和PI双染色实验测定细胞凋亡，通过流式细胞术检测细胞周期，采用Transwell小室法实验检测各组胆管癌细胞侵袭能力的变化。
　　结果:胆管癌QBC939细胞系中存在iNOS表达;RT-PCR及Western blot检测显示实验组3条siRNA均能有效抑制iNOS mRNA及蛋白表达(p＜0.05)，以siRNA2作用效果最显著;MTT检测显示转染iNOS-siRNA后人胆管癌QBC939细胞的增殖受到显著抑制(p＜0.05);流式细胞术检测显示转染iNOS-siRNA后凋亡率明显增加(p＜0.05); Transwell检测显示沉默iNOS基因后，人胆管癌QBC939细胞的侵袭能力显著降低(p＜0.05)。
　　结论:1.RNA干扰能有效沉默iNOS基因在胆管癌QBC939细胞中的表达;2.沉默iNOS基因明显抑制了胆管癌QBC939细胞的增殖能力、侵袭能力，促进其凋亡。

目录

摘要

前言

第一章 iNOS在人胆管癌QBC939细胞中的表达

第一节 材料与方法

第二节 结果

第三节 讨论

第二章 沉默iNOS基因对人胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

第一节 材料与方法

第二节 结果

第三节 讨论

结论

参考文献

附录

致谢

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