人嗅黏膜间充质干细胞与嗅鞘细胞在鼻黏膜中分布的研究

摘要

目的: 通过研究人嗅黏膜间充质干细胞(hOM-MSCs)与人嗅黏膜嗅鞘细胞(hOM-OECs)在鼻黏膜组织中的具体分布情况，指导自体移植时鼻黏膜组织的取材部位，以及进一步研究两种细胞间的相互作用，提高hOM-MSCs与hOM-OECs的培养率及移植治疗效果，为联合移植治疗神经损伤的进一步研究奠定基础。 方法: 1.选择来本院就诊的拟行细胞移植治疗的患者，排除鼻腔肿瘤、鼻息肉以及嗅黏膜损伤、萎缩性鼻炎等嗅黏膜疾病的患者，在获取组织前需与患者进行沟通并取得患者的同意，签署自愿同意书;在术前三天做好鼻内清洁，适当剃除鼻毛，滴加氯霉素滴鼻液等。实验在经伦理委员会同意后进行。 2.通过鼻内窥镜获取研究对象的鼻黏膜组织，并根据所取鼻黏膜的部位分为嗅区黏膜组与呼吸区黏膜组; 3.将鼻黏膜组织制成组织切片后进行HE染色与免疫荧光染色，通过免疫荧光双抗体标记法标记鼻黏膜组织中的hOM-MSCs与hOM-OEC，其中hOM-MSCs选择CD271+CD105，CD271+CD166标记，hOM-OECs选择CD271+SOX10，CD271+S100β标记，明确hOM-MSCs与hOM-OEC在鼻黏膜组织中的分布情况。 结果: 1.人嗅黏膜间充质干细胞分布于嗅区黏膜与呼吸区黏膜的固有层中，以嗅区黏膜分布偏多; 2.人嗅黏膜嗅鞘细胞分布于嗅区黏膜中的上鼻甲中。 结论: 1.人嗅黏膜间充质干细胞分布广泛，在嗅区黏膜与呼吸区黏膜固有层均有分布，以嗅区黏膜分布偏多; 2.人嗅黏膜嗅鞘细胞分布于嗅区黏膜中的上鼻甲。

目录

摘要

引言

第一章实验材料

1．鼻黏膜组织的获取前期准备

2．主要试剂

3．主要实验仪器

4．手术器械及其他操作器械

5．基础试剂的配制

5．1 0．01M磷酸盐缓冲液(PBS)制备

5．2 10％中性缓冲福尔马林固定液配置

第二章实验方法

1取材前的准备

2获取鼻黏膜组织块

3鼻黏膜组织蜡块的制作

3．1组织块的固定

3．2冲洗

3．3脱水

3．4透明

3．5浸渗

3．6包埋

4鼻黏膜组织切片HE染色

5鼻黏膜组织切片免疫荧光染色

第三章实验结果

1鼻黏膜组织的HE染色

1．1嗅区黏膜的HE染色

1．2呼吸区黏膜的HE染色

2鼻黏膜组织的免疫荧光染色

2．1 hOM-MSCs在嗅区黏膜中的免疫荧光染色

2．2 hOM-MSCs在呼吸区黏膜中的免疫荧光染色

2．3 hOM-OECs在嗅区黏膜中的免疫荧光染色

2．4 hOM-OECs在呼吸区黏膜中的免疫荧光染色

第四章讨论

1．鼻黏膜的组织结构

2．嗅黏膜作为自体取材的优势

4．OECs对微环境的影响以及目前hOM-OECs研究的难点

结论

参考文献

综述

主要缩写词表

在读期间发表的主要学术论文及参与的课题

致谢

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