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第1章 绪 论
1.1 碳纳米材料
1.1.1 富勒烯
1.1.2 碳纳米管
1.1.3 石墨烯
1.2 金属纳米材料
1.2.1 磁性纳米颗粒
1.2.2 金纳米颗粒
1.3 本研究论文的工作内容
第2章 基于氧化石墨烯和核酸外切酶Ⅲ辅助目标DNA循环的放大方法用于核酸的检测
2.1 前言
2.2 实验部分
2.2.1 试剂和仪器
2.2.2 氧化石墨烯的制备
2.2.3 目标DNA的检测
2.3 结果与讨论
2.3.1 实验设计与工作原理
2.3.2 纳米层状氧化石墨烯的表征
2.3.3 目标DNA检测的荧光信号响应
2.3.4 氧化石墨烯猝灭荧光能力的考察
2.3.5 核酸外切酶Ⅲ浓度与反应时间的优化
2.3.6 高效液相色谱与荧光各向异性表征
2.3.7 目标DNA的检测
2.3.8 特异性识别碱基错配分析
2.4 小结
第3章 基于纳米层状氧化石墨烯的生物传感平台用于抗癌药物的筛选
3.1 前言
3.2 实验部分
3.2.1 试剂与仪器
3.2.2 纳米层状氧化石墨烯的制备
3.2.3 目标中药单体的筛选
3.2.4 熔链温度分析
3.3 结果与讨论
3.3.1 实验设计与工作原理
3.3.2 纳米层状氧化石墨烯的表征
3.3.3 氧化石墨烯荧光猝灭能力的考察
3.3.4 目标药物筛选的荧光信号响应
3.3.5 氧化石墨烯浓度的优化
3.3.6 熔链温度(Tm)分析
3.3.7 荧光各向异性表征
3.3.8 大豆苷元的检测
3.3.9 传统中药单体的筛选
3.4 小结
第4章 基于氧化石墨烯-多肽共价交联的生物传感平台用于caspase-3的活性检测和活细胞成像分析
4.1 前言
4.2 实验部分
4.2.1 试剂与仪器
4.2.2 氧化石墨烯的制备
4.2.3 氧化石墨烯与多肽探针的共价交联反应
4.2.4 caspase-3体外活性检测
4.2.5 caspase-3活性的活细胞成像分析
4.2.6 比色试剂盒对细胞提取液中caspase-3的活性分析
4.2.7 三种蛋白水解酶的多色分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 实验设计与工作原理
4.3.2 氧化石墨烯与多肽共价交联物的表征
4.3.3 氧化石墨烯与多肽共价交联物的稳定性考察
4.3.4 蛋白水解酶caspase-3的荧光信号响应及控制实验
4.3.5 实时荧光信号考察
4.3.6 荧光各向异性表征
4.3.7 目标蛋白水解酶caspase-3活性的检测
4.3.8 活细胞内caspase-3活性的成像分析
4.3.9 比色试剂盒检测细胞提取液中caspase-3的活性
4.3.10 蛋白水解酶的多色分析
4.4 小结
第5章 基于纳米金-DNA的复合探针用于端粒酶活性和二价铅离子的检测
5.1 前言
5.2 实验部分
5.2.1 试剂和仪器
5.2.2 纳米金的合成
5.2.3 纳米金的DNA修饰
5.2.4 HeLa细胞的培养和端粒酶的提取
5.2.5 端粒酶活性的检测
5.3 结果与讨论
5.3.1 实验设计与工作原理
5.3.2 DNA修饰纳米金的表征
5.3.3 荧光探针序列的优化
5.3.4 端粒酶检测的荧光响应
5.3.5 端粒酶扩增时间的优化
5.3.6 目标端粒酶活性的检测
5.3.7 端粒酶活性的AZT抑制实验
5.3.8 二价铅离子(Pb2+)检测的实验设计和工作原理
5.3.9 目标Pb2+的检测
5.3.10 干扰实验
5.4 小结
第6章 基于构象变换机理的电化学DNA生物传感器用于端粒酶活性的检测
6.1 前言
6.2 实验部分
6.2.1 试剂与仪器
6.2.2 二茂铁甲酸标记NH2-修饰的寡核苷酸信号探针
6.2.3 HeLa细胞的培养和端粒酶的提取
6.2.4 金电极的处理和巯基捕获探针的自组装
6.2.5 二茂铁甲酸标记的信号探针与巯基捕获探针的杂交反应
6.2.6 端粒酶扩增反应以及电化学信号检测
6.3 结果与讨论
6.3.1 实验设计与工作原理
6.3.2 DNA传感器的电化学信号响应
6.3.3 DNA传感器的电化学阻抗表征
6.3.4 金电极巯基捕获探针固定密度的确定
6.3.5 信号探针与巯基捕获探针杂交温度和时间的优化
6.3.6 端粒酶扩增反应时间的优化
6.3.7 目标端粒酶活性的检测
6.3.8 端粒酶活性的AZT抑制实验
6.4 小结
第7章 基于T7核酸外切酶辅助目标循环的放大方法用于端粒酶活性的超灵敏检测
7.1 前言
7.2 实验部分
7.2.1 试剂与仪器
7.2.2 HeLa细胞的培养和端粒酶的提取
7.2.3 端粒酶活性的检测
7.2.4 控制实验和验证实验
7.3 结果及讨论
7.3.1 实验设计与工作原理
7.3.2 端粒酶活性检测的荧光信号响应
7.3.3 端粒酶活性检测的验证实验
7.3.4 端粒酶扩增时间的优化
7.3.5 T7核酸外切酶酶切时间的优化
7.3.6 高效液相色谱表征
7.3.7 荧光各向异性表征
7.3.8 目标端粒酶活性的检测
7.3.9 端粒酶活性的AZT抑制实验
7.4 小结
结 论
参考文献
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录
致 谢