基于TH1/TH2失衡探讨补肾健脾，解毒利咽法治疗IgA肾病模型大鼠作用机制

摘要

目的:
　　观察补肾健脾，解毒利咽法对IgA肾病模型大鼠TH1/TH2的影响，探讨该法治疗IgA肾病的作用机制，为临床治疗IgA肾病提供实验学依据。
　　方法:
　　选择雄性健康清洁级Wistar大鼠80只，体重180±20g，购买回来后适应性饲养1周，采用分层随机的分组方法将大鼠分为空白组10只，造模组70只。空白组给予灌胃生理盐水、皮下注射生理盐水、尾静脉注射生理盐水，造模组采用灌胃牛血清白蛋白(Bevine serum albumin，BSA)、皮下注射四氯化碳(Carbon tetrachloride，CCL4)、尾静脉注射脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)，制备IgA肾病模型大鼠。IgA肾病模型制备成功后，将造模组分为模型组、洛汀新对照组、补肾健脾，解毒利咽中药高、中、低剂量组。给予对照组洛汀新片组予6mg/(kg.d)灌胃;予补肾健脾，解毒利咽中药低剂量组4ml/(kg·d)灌胃，（相当于中药饮片量8g/kg）、中剂量组4ml/(kg·d)灌胃，（相当于中药饮片量16g/kg）、高剂量组中药汤剂4ml/(kg·d)灌胃，（相当于中药饮片量32g/kg灌胃）;空白组、模型组每天给予生理盐水灌胃，4ml/只。共给药8周。(1)大鼠的一般状态;(2)检测实验各组大鼠24小时尿红细胞计数及24小时尿蛋白尿定量;(3)检测大鼠血清肾功能、肝功能;(4)测定肾脏组织中TH1/TH2的含量;(5)观察TH1/TH2在肾组织中的定位表达;(6)检测IgA复合物在肾脏组织中的沉积。
　　结果:
　　(1)在实验过程中大鼠共计死亡24只，其中验证模型处死12只大鼠，造模过程中死亡10只，治疗过程中死亡2只（治疗过程洛汀新对照组死亡2只）。(2)空白组大鼠在整个实验过程中一般状态较好，无明显异常。各模型组大鼠在给予四氯化碳皮下注射后表现为精神萎靡，毛发杂乱不光泽，口鼻血性分泌物，腹泻，体重下降等表现。经过治疗2周后各治疗组大鼠状态好转，腹泻症状减少，体重增加。(3)空白组大鼠无血尿及蛋白尿症状出现，造模组大鼠24小时尿红细胞计数和24小时尿蛋白定量明显升高，各治疗组经过补肾健脾，解毒利咽法治疗后大鼠尿红细胞和蛋白尿有所下降(p＜0.05)，中药组优于洛汀新组(p＜0.05)(4) IgA肾病模型大鼠肾脏组织中IFN-γ的水平与空白组比较明显下降，IL-4的水平明显升高。(5)各治疗组大鼠经治疗后IFN-γ水平明显上调(p＜0.05)，IL-4的水平明显下调(p＜0.05)，且中药组疗效优于洛汀新组(p＜0.05)。(6)实验各组大鼠肾功能、肝功能比较无统计学差异(p＞0.05)。
　　结论:
　　(1) IgA肾病模型大鼠肾组织中TH1/TH2平衡发生偏移，向TH2偏移。
　　(2)在经过给药治疗后TH1的水平明显回升，说明TH1与病情呈正相关;经给药治疗后TH2的水平有所下调，说明TH2与病情呈负相关;说明TH1/TH2的异常表达参与了IgA肾病的发病，从而导致IgA肾病的发生。
　　(3)通过各治疗组比较，补肾健脾，解毒利咽方药可能的机制是通过调节IgAN模型大鼠肾组织中THI/TH2平衡，来延缓IgAN的发生发展。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

文献综述

IgA肾病中医研究进展

1 中医病名

2 病因病机

3 证型研究

4 中医治疗

5 调摄

6 小结

IgA肾病现代医学研究进展

1 IgAN的发病机制

2 IgA肾病临床表现

3 IgA肾病治疗

4 小结

实验研究

1 实验材料

1．1 实验动物

1．2 实验药品

1．3 实验主要试剂

1．4 实验主要仪器

2 实验方法

2．1 模型建立

2．2 模型验证

2．3 给药方法

2．4 观察指标

2．5 取材

2．6 尿液检测指标

2．7 血清学指标检测

2．9 ELISA检测肾组织中H2(IL-4)、THl(INF-γ)的表达

3 统计方法

实验结果

1 一般情况

2 各项指标检测

2．1 各组大鼠24小时尿红细胞计数比较

2．2 各组大鼠24小时尿蛋白定量比较

2．3 各组大鼠肝肾功能变化比较

2．4 各组大鼠肾组织中H2(IL-4)、THl(INF-γ)含量

讨论

2 IgA肾病发病机制与TH1／TH2关系

3 补肾健脾，解毒利咽方药的立法意义及方解

4 补肾健脾，解毒利咽方药与洛汀新疗效分析

结论

致谢

参考文献

附图