复方二精灵多糖的提取分离与结构研究

摘要

复方二精灵多糖是由等量的枸杞子和黄精配伍提取纯化而得，是该复方中主要的生物活性成分。根据报道，复方二精灵多糖具有能明显提高衰老小鼠皮肤羟脯氨酸含量、成纤维细胞数和SOD 活性，降低衰老小鼠皮肤组织中脂褐质含量，具有抗皮肤衰老的功效，还具有能有效阻止海马细胞内钙积聚，在一定程度上减弱海马细胞内钙超载所致海马细胞损伤和有效阻止Glu 诱导的海马神经凋亡，具有抗老年痴呆的功效。
　　 本文以宁夏枸杞子和滇黄精为原料，利用现代分离分析技术，对复方二精灵多糖进行了提取、分离和纯化，并对其理化性质以及结构特征进行了比较系统的研究，主要结果如下：
　　 1 二精灵多糖的提取、分离和纯化枸杞子和黄精混合物经脱色、脱单糖、沸水提取、乙醇沉淀可得复方二精灵多糖（2JL）。
　　 2JL 经DEAE－纤维素（OH-）分离可得到6 个组分，选取复方二精灵组分1 和组分4 进一步分离，组分1 经过Sepharose CL-4B 凝胶柱层析分离纯化，组分4 经过Sephadexa G－50 凝胶柱层析分离纯化可得到2 种多糖级分分别为2JLⅠ和2JLⅡ。
　　 2 二精灵多糖的理化性质与结构特征经高效液相色谱检测分析得多糖级分2JLⅠ和2JLⅡ为均一多糖。其中性糖含量分别为62.82 ％和85.39％，蛋白质含量为25.7％和7.42％。经GPC 法检测，2JLⅠ、2JLⅡ的分子量（Mn）分别为811000、2000。经气相色谱分析2JLⅠ主要由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖组成，摩尔比分别为0.141:0.019:0.189: 0.021:
　　 0.213；2JLⅡ主要由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成，摩尔比分别为0.190：0.283：
　　 0.082。这两种多糖级分均是糖蛋白质缀合物。经红外光谱、高碘酸氧化和质谱等分析，2JLⅠ、2JLⅡ主要含α－糖苷键。经β消除反应分析，2JLⅡ的糖蛋白分子中多糖与氨基酸的连接方式为O－型连接。2JLⅡ可与刚果红发生络合反应，其络合物的最大吸收波长在0-0.5mol/L 的氢氧化钠溶液中所表现出的特殊变化趋势表明多糖级分2JLⅡ有可能不具有三股螺旋结构。