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测量和分析纤毛运动活动的新方法

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第一章 绪 论

1.1 纤毛概述

1.2 本文构想

第二章 测量和分析纤毛运动的新方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 实验结果

2.4 小结

第三章 纤毛运动活动与细胞内钙同时记录

3.1 实验材料

3.2 实验方法

3.3 实验结果

3.4 小结

第四章 机械刺激增加细胞内钙水平增强纤毛运动活动

4.1 实验材料

4.2 实验方法

4.3 实验结果

4.4 小结

结果与讨论

参考文献

致谢

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摘要

气管中纤毛的运动活动(CBA)通过清除呼吸道中的痰液和病原体扮演着重要的作用。因为纤毛运动活动极其复杂以至于不能仅仅通过频率来描述其特征,所以我们用激光共聚焦显微镜的线扫模式记录纤毛运动活动并且定义了六个参数来反应纤毛运动活动。当测量纤毛运动的小鼠纤毛细胞时,这六个参数的值都大于零。
  接下来我们用10微摩尔腺嘌呤核苷三磷酸刺激细胞,同时记录细胞内钙水平和纤毛运动活动。我们发现细胞内钙水平先增高,紧接着纤毛运动活动增强。在这六个参数之中,频率、幅度和积分面积显著增高,然而上升时间、下降时间和半数衰变时间明显下降。这些结果表明六个参数适合评估纤毛运动活动而且升高的细胞内钙水平可能增强纤毛运动活动。
  接下来我们用机械刺激纤毛尖端,并且用我们建立的方法观察各个参数的变化。结果表明机械刺激介导的细胞内钙水平和纤毛运动活动的变化不仅和腺嘌呤核苷三磷酸引导的变化相似,而且这种变化可以被10微摩尔的钙离子螯合剂BAPTA-AM处理十分钟阻断掉。此外,在无钙条件下,我们检测到相同的阻断效果,当向浴槽中加入2毫摩尔的钙离子后可以重新恢复细胞内钙水平的增加和纤毛运动活动的增强。
  综上所述,我们提供了一种能够同时测量和分析纤毛运动活动并监控细胞内钙水平的方法。并且用这个方法证明了当机械刺激纤毛尖端时,细胞外钙离子的进入使细胞内钙水平升高,转而促发纤毛运动活动的增强。

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