南方山荷叶的药效成分及炮制机理研究

摘要

南方山荷叶(Diphylleia sinensis H.L.Li)为小檗科山荷叶属植物，又名“江边一碗水”，也称窝儿七、山荷叶等,是土家族常用药。其干燥根茎可供药用，在临床上，土家药匠常常将它用于治疗癌症、跌打损伤、风湿性关节炎等疾病。本文主要对南方山荷叶根茎部位的黄酮类与多糖类药效成分进行研究。
　　通过研究南方山荷叶炮制前后化学成分的变化对其炮制机理进行初步探究，发现炮制能够增加南方山荷叶主要化学成分的溶出率，经醋蒸后鬼臼毒素少量转化为苦鬼臼毒素。
　　对南方山荷叶炮制前后的总黄酮进行提取分离及含量测定，结果表明：与生品相比，其醋炙品与醋蒸品的总黄酮的提取率与含量均有所增加，其中，醋炙品总黄酮提取率及含量均高于醋蒸品与生品。
　　南方山荷叶生品及其炮制品总黄酮的抗炎、镇痛活性研究采用冰醋酸致扭体法，二甲苯致小鼠耳廓肿胀法，热板法。结果显示：南方山荷叶总黄酮能够显着抑制小鼠耳廓肿胀炎症，减轻冰醋酸所致的疼痛，降低小鼠的扭体次数，延长小鼠在热板上的舔后足时间，说明其具有良好的抗炎镇痛作用，且炮制品的镇痛作用大于生品。
　　通过H22荷瘤小鼠模型及MTT法研究南方山荷叶总黄酮的体内外抗肿瘤活性发现：总黄酮对肺癌细胞A549及肝癌细胞HepG2的增殖均有抑制作用，且对HepG2细胞增殖的抑制作用小于对A549细胞的抑制作用。体内抗肿瘤实验结果显示，南方山荷叶总黄酮具有良好的体内抗肿瘤效果，且炮制品的效果优于生品。采用Hoechst33258对给药后的HepG2细胞进行荧光染色，实验发现其总黄酮可诱导HepG2细胞产生凋亡。
　　对南方山荷叶粗多糖的提取工艺进行研究，寻找其最佳提取工艺，采用正交实验的方法来确定各因素对粗多糖得率的影响，结果显示最佳提取工艺为：提取时间为2 h,料液比为1:12，提取温度为80℃，提取次数为3次，并通过紫外分光光度法对9组粗多糖样品的多糖含量进行测定。对纯化后的多糖采用气相色谱法研究其组成成分发现：南方山荷叶多糖含有鼠李糖，核糖，阿拉伯糖，木糖，果糖，葡萄糖，乌来糖，半乳糖，甘露糖等组成成分。
　　对南方山荷叶多糖的体内外抗肿瘤活性进行研究发现：南方山荷叶多糖对A549及HepG2细胞的增殖均无抑制作用；对H22荷瘤小鼠的肿瘤生长有一定的抑制作用，但能够提高荷瘤小鼠的脾脏指数，说明其具有一定的免疫调节作用。通过小鼠碳粒廓清、血清溶血素实验以及小鼠体内脾细胞转化，体外脾细胞增殖实验研究南方山荷叶多糖对小鼠免疫系统的影响。结果显示：南方山荷叶多糖可增强小鼠碳粒廓清指数和吞噬指数并恢复免疫低下小鼠的免疫力。此外，还可提高小鼠的溶血素水平，促进小鼠脾细胞的体内转化和体外增殖。

目录

声明

第一章 前言

1.1南方山荷叶药材来源简介

1.2 南方山荷叶研究进展

1.3 南方山荷叶的炮制研究进展

1.4 植物中黄酮与多糖类化学成分的研究进展

1.5 本课题研究内容与意义

第二章南方山荷叶炮制机理的初步研究

2.1 实验仪器与材料

2.2实验方法

2.3实验结果

2.4 讨论

第三章 炮制对南方山荷叶总黄酮化学成分的影响

3.1 实验仪器与材料

3.2 实验方法

3.3 实验结果

3.4 讨论

第四章 炮制对南方山荷叶总黄酮抗炎镇痛活性的影响

4.1 实验仪器与材料

4.2 实验方法

4.3 实验结果

4.4 讨论

第五章 炮制对南方山荷叶总黄酮抗肿瘤活性的影响

5.1 实验仪器与材料

5.2 实验方法

5.3 实验结果

5.4 讨论

第六章 南方山荷叶多糖提取工艺及其组成成分分析

6.1 实验仪器与材料

6.2 实验方法

6.3 结果

6.4 讨论

第七章 南方山荷叶多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用

7.1 实验仪器与材料

7.2 实验方法

7.3 实验结果

7.4 讨论

结论与展望

参考文献

致谢

附录A 攻读学位期间发表的学术论文