邓恩桉组织培养与无性系快繁技术的建立

摘要

该文对抗寒树种邓恩桉(E.dunnii)的组织培养(tissue culture)和无性系选育(clone select-breeding)进行了系统的研究.以优树邓恩桉实生苗为材料,以芽诱导方法培养完整植株为途径,研究了生长素IAA、IBA、NAA,细胞分裂素BA、ZT、KT,多效唑PP333,活性炭,基本培养基(大量元素,微量元素,有机物),蔗糖,温度,光照等对芽诱导、增殖、壮苗和生根的影响.在生根方面取得了突破性的进展,基本解决了邓恩桉无性繁殖难生根的问题,选出了几个繁殖系数大和生根率高的优良无性系.为邓恩桉的推广应用打下了坚实的基础,具有一定的开发价值.主要结果如下:1、初代培养:从室外采集枝条,选择顶芽以下第3-6位腋芽尚未萌发的半木质化芽茎段,将其剪切成1cm左右,洗洁剂清洗1-2min,流水冲洗30min以上,然后在超净台上用70％酒精消毒5s,0.1％升汞消毒30s,消毒效果较好,诱导率高,褐化率低.2、继代培养:继代培养以改良MS为基本培养基,随继代次数的增加逐渐减少细胞分裂素BA和生长素NAA的浓度.最初几次继代,BA的浓度为0.5mg·L<'-1>,NAA的浓度为0.2mg·L<'-1>.然后BA的浓度逐渐降低到0.1-0.3mg·L<'-1>,NAA的浓度逐渐降低到0.05-0.1ing·L<'-1>,继代5-6次后,BA的浓度保持在0.1-0.3mg·L<'-1>,NAA的浓度保持在0.05-0.1mg·L<'-1>.3、壮苗和有效芽诱导:以改良MS+BA0.2mg·L<'-1>+NAA0.1mg·L<'-1>+30％蔗糖+0.55％卡拉胶为基础和对照,①分别加入0.01％、0.03％、0.06％、0.1％的活性炭,同时提高BA的浓度为0.5-1mg·L<'-1>,IAA浓为0.1-0.5mg·L<'-1>;②分别加入1mg·L<'-1>、2mg·L<'-1>、5mg·L<'-1>的生物素,③改良MS(铁盐、有机物1.5倍),蔗糖分别增加为4％和5％,共11个处理,结果表明:活性炭对邓恩桉组培苗的生长起抑制作用,生物素所起的作用不明显,邓恩桉组培继代苗的生长离不开细胞分裂素和生长素,一旦缺少继代苗很快枯萎死亡.壮苗和有效芽的诱导在工厂化育苗中可以省去,以便节约苗木的生产成本.4、生根:大量元素、蔗糖、生长素(IBA、NAA、IAA)、继代次数以及继代培养中所用激素的浓度、不同无性系和光照对生根均有显著影响.5、优良无性系的筛选:在所选的50原株优树邓恩桉实生幼苗中,不同植株之间在初代培养中芽的诱导率和生长速度,继代培养中的芽增殖倍数和有效芽数量,生根培养中有效芽的生根率等方面,都存在较大的差异,而同一植株的不同芽茎段之间的差异很少,可以看作一个无性系(即由原株单系无性繁殖所产生的一系列分株).

目录

摘要

ABSTRACT

1植物组织培养与邓恩桉繁殖技术研究综述

1.1植物组培快繁的意义

1.1.1植物组培加速了优良林木树种的推广应用

1.1.2植物组培是林木遗传育种的重要手段

1.1.3利用植物组培对无性系进行脱毒与复壮

1.1.4加快无性系林业发展的进程

1.2植物组织培养技术的研究进展

1.2.1影响木本植物组织培养研究的有关因子

1.2.2愈伤组织及胚状体的培养

1.2.3组织培养的基本原理

1.2.4组织培养的方法

1.2.5植株再生过程中遇到的问题

1.2.6组织培养的前景及问题

1.3邓恩桉所具有的优良生物学特性

1.3.1树体高大、生长迅速

1.3.2耐寒能力强

1.3.3耐高温抗旱能力强

1.3.4病虫害较少

1.3.5良好的经济价值

1.4邓恩桉繁殖研究进展

1.4.1邓恩桉种源、家系试验林的观测研究

1.4.2邓恩桉开花物候和种子生产力研究

1.5抗寒桉树无性繁殖的发展前景

1.5.1选择和培育桉树耐寒品种的重要性

1.5.2选择和培育耐寒桉树种的可行性

1.5.3邓恩桉在中国的发展前景

2.邓恩桉组织培养与无性系快繁技术的建立

2.1试剂与材料培养

2.1.1主要试剂

2.1.2实验材料

2.1.3材料培养

2.1.4材料处理方法

2.2实验方法

2.2.1外植体的选择和消毒

2.2.2诱导培养基的选择和优化

2.2.3继代培养基的选择和优化

2.2.4壮苗和有效芽诱导的研究

2.2.5生根培养基的选择和优化

2.2.6两步生根法的研究

2.2.7不同无性系对生根的影响

2.2.8继代培养次数对生根的影响

2.2.9优良无性系的筛选

2.3结果与分析

2.3.1诱导培养研究的结果与分析

2.3.2继代培养研究的结果和分析

2.3.3有效芽诱导和壮苗研究的结果和分析

2.3.4.生根培养研究的结果和分析

2.3.5优良无性系筛选研究的结果与分析

2.4讨论与结论

2.4.1污染问题的控制

2.4.2影响褐化的因素

2.4.3减少褐化的措施

2.4.4玻璃化苗发生的原因

2.4.5组织培养玻璃化问题的克服

2.4.6玻璃化苗的综合防治

2.4.7组织培养继代苗的遗传变异

2.4.8组织培养生根的机理和影响因素

2.4.9结论

参考文献

致谢