青蒿琥酯对哮喘大鼠模型治疗作用的实验研究

摘要

目的：观察核因子-КB（nuclear factor-КB，NF-КB）、Toll样受体4（Toll like receptor 4,TLR4）在抗原致敏支气管哮喘大鼠气道重塑模型中的表达情况，运用青蒿琥酯进行干预，观察NF-КB、TLR4表达的变化，探讨TLR4—NF-КB信号传导通路在气道重塑的形成过程中的作用，以及青蒿琥酯对气道高反应性和气道重塑的影响及其作用机制。 方法：将Wistar大鼠随机分为空白对照组，哮喘模型组，地塞米松治疗组，青蒿琥酯低剂量、中剂量、高剂量治疗组等6组。采用卵白蛋白（OVA）致敏的方法制备哮喘大鼠气道重塑模型。治疗组采用雾化吸入的方式给药治疗。 在采集标本后，进行外周血白细胞分类计数和支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞分类计数；HE染色检测肺组织病理形态学改变；并利用PowerLab系统记录离体气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应；采用免疫组织化学技术、RT-PCR技术检测核因子NF-КB P65蛋白、TLR4-mRNA在哮喘大鼠支气管上皮的表达。 结果：哮喘模型组的外周血白细胞分类计数和支气管肺泡灌洗液白细胞分类计数，其嗜酸性粒细胞数目明显高于其他各组，地塞米松组和青蒿琥酯各组嗜酸性粒细胞数目与哮喘模型组比较明显降低。 肺组织病理形态学检测显示哮喘模型组大鼠支气管粘膜皱襞增多，肺泡隔增厚，气道平滑肌的厚度明显增加，粘膜下、管壁及肺泡间质均见有大量嗜酸性粒细胞浸润，管腔狭窄，有典型的气道重塑表现；而地塞米松治疗组及青蒿琥酯各组炎症反应明显减轻，粘膜结构完整，无明显的气道重塑表现。 离体气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应实验结果显示地塞米松组和青蒿琥酯中、高剂量组的气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应明显降低，与哮喘模型组比较，有显著性差异。 免疫组织化学技术检测结果显示哮喘模型组NF-КBp65的表达量明显高于空白对照组及其他各组；经过地塞米松、青蒿琥酯雾化吸入治疗后，NF-КBp65的表达降低，以高剂量组疗效最为明显。 RT-PCR技术检测结果显示哮喘模型组TLR4-mRNA的表达量明显高于空白对照组及其他各组；经过地塞米松、青蒿琥酯雾化吸入治疗后，TLR4-mRNA的表达降低，以高剂量组疗效最为明显。 结论：在抗原致敏支气管哮喘大鼠气道重塑模型中，NF-КB P65蛋白、TLR4-mRNA表达均增高。雾化吸入青蒿琥酯对抗原致敏支气管哮喘大鼠气道重塑和气道高反应性有着的干预和治疗的作用，能够一定程度上抑制NF-КB P65蛋白、TLR4-mRNA在哮喘大鼠支气管上皮的表达，干预TLR4—NF-КB信号传导通路，同时也提示TLR4—NF-КB信号传导通路在气道重塑的形成和进展中起到了重要的作用。