五首活血化瘀方对急性心肌缺血犬心肌细胞凋亡的影响及机制的实验研究

摘要

目的:探讨五首活血化瘀方对急性心肌缺血犬(心血瘀证模型)心肌细胞凋亡的影响及机制,比较各方作用的差异.方法:先按体重分层,再用随机数字表法随机将35只犬分为7组:对照组,心肌缺血组,丹参饮组,血府逐瘀汤组,失笑散组,活络效灵丹组,桃红四物汤组,灌胃给药,每天一次,给药剂量20ml/kg,对照组及心肌缺血组予蒸馏水,连续灌胃5天.各给药组于第5天灌胃后穿线结扎冠状动脉左前降支第二角支处,造成急性试验性心肌缺血模型(心血瘀证模型),对照组仅穿线不结扎.造模后3h采血,测定血清肌酸磷酸激酶(CPK),乳酸脱氢酶(LDH).实验结束后处死动物,摘取动物心脏拭干后,称取心脏组织,测定丙二醛(MDA)及超氧化歧化酶(SOD),心肌组织病理学的病理形态改变,心肌细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2,Bax的表达.结果:1.血府逐瘀汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮均能有效缓解缺血对心肌造成的损伤,使酶的外漏减少,CPK与LDH含量均低于缺血组,四组间比较无显著差异.而心肌缺血组及失笑散组CPK、LDH含量明显升高,与对照组比较差异显著,失笑散不能有效地使酶的外漏减少.2.血府逐瘀汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮均能显著提高缺血心肌组织SOD活性,同时降低MDA含量,以减轻脂质过氧化物损伤,四组间比较无显著差异.而失笑散不能有效减轻脂质过氧化物损伤.3.对照组无明显细胞变性与坏死,仅见极少量凋亡阳性细胞;心肌缺血组与失笑散组心肌细胞凋亡明显增多,心肌组织坏死;丹参饮组、血府逐瘀汤组、活络效灵丹组、桃红四物汤组心肌细胞凋亡及坏死均显著减轻.4.心肌缺血组与失笑散组细胞凋亡相关蛋白Bax表达明显增多,Bcl-2表达明显减少;丹参饮组、血府逐瘀汤组、活络效灵丹组、桃红四物汤组与心肌缺血组及失笑散组比较,细胞凋亡相关蛋白Bax表达明显减少,Bcl-2表达明显增多,存在显著差异,而四组间比较无显著差异.

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

引言

第一部分材料与方法

1.实验材料

1.1实验动物

1.2实验药品

1.3实验试剂

1.4实验仪器

2.实验方法

2.1实验分组

2.2造模方法

2.3给药剂量与方法

2.4指标检测及方法

第二部分结果与分析

1.血清肌酸磷酸激酶(CPK)及乳酸脱氢酶(LDH)检测结果

2.丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)检测结果

3.急性心肌缺血犬心肌细胞凋亡检测结果

4.急性心肌缺血犬心肌细胞凋亡相关基因Bc1-2，Bax表达水平的检测结果

5.急性心肌缺血犬心肌组织病理学的检测结果

第三部分讨论部分

1.祖国传统医学对血瘀证的认识

2.从处方药物现代药理学活血化瘀的依据探讨五首活血化瘀方对心血瘀证的干预作用

3.从五首活血化瘀方的立法依据与组方特色探讨五首活血化瘀方对心血瘀证的干预作用

4.从五首活血化瘀方现代药理学探讨对心血瘀证的干预作用

5.从分子生物学角度探讨五首活血化瘀方对心血瘀证的干预作用

5.1心肌缺血过程中膜稳定性降低，酶的外漏

5.2心肌缺血过程中自由基的产生

5.3缺血心肌细胞凋亡的发生

5.4细胞凋亡过程中细胞凋亡调控基因相关蛋白的作用

6.研究意义

结语

致谢

参考文献

附录:

附录一病理照片及结果统计图

附录二文献综述：中药对血瘀证基因表达干预作用的研究进展

附录三攻读硕士学位期间发表论文及获奖情况