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【6h】

虾的组织培养和对虾无包涵体杆状病毒的初步研究

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文摘

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前言

第一部分虾组织的培养

一、实验材料

1.实验用虾

2.培养基

3.常用试剂

二、实验方法

1.对虾的暂养和血淋巴液pH值及主要无机盐离子浓度的测定

2.培养基中螯虾血清的制备

3.含真菌分泌物培养基的制备

4.原代培养

三、结果与分析

1.斑节对虾血淋巴液的测定结果

2.虾组培的结果

四、讨论

第二部分对虾无包涵体杆状病毒的初步研究

一、实验材料

1.供试虾

2.光镜和电镜制样常用试剂

3.对虾杆状病毒PCR诊断试剂盒

4.其它试剂

5.供试昆虫细胞系

二、实验方法

1.病虾体症的观察

2.病毒的快速检测

3.切片样品的制备

4.病毒粒子的分离纯化

5.活体感染实验(250000rpm,50min)

6.烟台市牟平区1997年病虾匀浆物对昆虫细胞的感染实验

7.日照市1998年中国对虾病对虾病血淋巴液感染斑节对虾淋巴组织原代培养细胞的实验

8.对虾杆状病毒PCR试剂盒诊断实验

三、结果与分析

1.中国对虾体内核型无包涵体杆状病毒

2.中国对虾体内质型无包涵体杆状病毒

四、讨论

参考文献

图版

致谢

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摘要

该研究的目的是通过组织培养来了解虾病毒病的发生机制,但由于甲壳动物组培目前难度较大,虾病毒来源不易稳定,该研究只获得了初步结果.该文报道了虾组培的条件、野外采集的暴发性流行病中国对虾体内的病原病毒及其某些生物学特性和病毒离体感染的初步结果.在不同地点采集的中国对虾病虾体内发现了不同的无现了不同的无包涵体杆状病毒,并对其进行了形态结构、发生过程、组织病理、活体感染、离体感染、分离纯化和PCR检测 的初步研究.

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