邻苯二甲酸二异辛酯对小鼠不同脏器ATPase活性的影响及其机制的研究

摘要

能量是生物各种生命活动的动力。ATP是生物体各种生命活动所需能量的直接来源，线粒体普遍存在于真核细胞的细胞质中，它是能量ATP的供给中心，是对各种损伤最为敏感的细胞器之一。ATP酶是用来水解ATP为生命活动提供能量的酶。生物体内的ATP和ATP酶在新陈代谢过程中具有极为重要的作用。目前国内外对邻苯二甲酸二异辛酯毒性的研究已有许多报道，且研究已经深入到了分子水平，但是关于DEHP对动物各个脏器的ATP酶以及线粒体的ATP酶活性的影响的研究还未见报道；此论文的研究对邻苯二甲酸二异辛酯生物学毒性的研究具有重要意义。 本实验选用SPF级昆明纯系雄性小鼠的肝脏、心脏、肾脏、大脑和睾丸为材料，探讨了DEHP体内染毒对小鼠各个脏器ATP酶和各个脏器线粒体ATP酶活性的影响以及可能的作用机制。实验根据ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。 实验结果表明，随着DEHP染毒剂量的增大，在肝脏、大脑、睾丸组织中，Na<'+>-K<'+>-ATP酶Ca<'2+>-Mg<'2+>-ATP酶的活性呈先下降后上升趋势，肝脏在200mg.kg<'-1>.d<'-1>时酶活性最低，大脑、睾丸在100mg.kg<'-1>.d<'-1>时酶活性最低。但是在心脏、肾脏组织中，Na<'+>-K<'+>-ATP酶和Ca<'2+>-Mg<'2+>-ATP酶的活性呈先上升后下降趋势；Na<'+>-K<'+>-ATP酶在200mg.kg<'-1>.d<'-1>浓度、Ca<'2+>-Mg<'2+>-ATP酶在300mg.kg<'-1>.d<'-1>浓度时，酶活性最高。在肝脏和心脏的线粒体中，Na<'+>-K<'+>-ATP酶和Ca<'2+>-Mg<'2+>-ATP酶的活性，随着DEHP染毒剂量的增大呈下降趋势，在肝脏线粒体中，300mg.kg<'-1>.d<'-1>浓度组Na<'+>-K<'+>-ATP酶的活性与对照组比有显著的差异性。 DEHP对同一器官的两种ATP酶(即Na<'+>-K<'+>-ATP酶和Ca<'2+>-Mg<'2+>-ATP酶)的活性的影响趋势是一致的。这提示DEHP对这两种酶的活性的影响机制可能具有相似性。但是，DEHP对不同器官中的同一种酶的活性的影响趋势是不相同的，也就是说DEHP对各个脏器的ATP酶活性的影响具有器官差异性。 因此，DEHP对小鼠脏器细胞ATP酶的活性是有影响的，对小鼠脏器细胞线粒体ATP酶的是有影响的，是导致机体各个脏器损伤和功能下降的重要因素之一，是导致机体慢性毒性的重要因素之一。

目录

文摘

英文文摘

声明

1.文献综述

1.1 DEHP的研究进展

1.1.1 DEHP的物理化学性质

1.1.2 DEHP的广泛应用

1.1.3 DEHP在人群中的暴露水平

1.1.4 DEHP在人体内的代谢

1.1.5 DEHP的毒性效应的研究

1.2 ATP酶对生物体的重要作用

1.3线粒体

1.4选题目的和意义

2.材料和方法

2.1实验材料

2.1.1实验动物

2.1.2主要化学试剂

2.1.3主要实验仪器

2.1.4主要实验溶液的配制

2.2实验方法

2.2.1样品处理

2.2.2体内染毒

2.2.3细胞酶液的提取

2.2.4线粒体酶液的制备

2.2.5 ATP酶活性的测定原理和方法

2.2.6蛋白含量的测定

2.3实验数据的统计学分析

3.实验结果

3.1 DEHP对小鼠各脏器ATP酶活性的影响

3.1.1 DEHP对小鼠肝脏ATPase活性的影响

3.1.2 DEHP对小鼠心脏ATPase活性的影响

3.1.3 DEHP对小鼠肾脏ATPase活性的影响

3.1.4 DEHP对小鼠大脑ATPase活性的影响

3.1.5 DEHP对小鼠睾丸ATPase活性的影响

3.2 DEHP对小鼠脏器线粒体ATP酶活性的影响

3.2.1 DEHP对小鼠肝脏线粒体ATPase活性的影响

3.2.2 DEHP对小鼠心脏线粒体ATPase活性的影响

4.讨论

4.1 DEHP对小鼠各脏器ATP酶活性的影响

4.1.1 DEHP对小鼠肝脏ATPase活性的影响

4.1.2 DEHP对小鼠心脏ATPase活性的影响

4.1.3 DEHP对小鼠肾脏ATPase活性的影响

4.1.4 DEHP对小鼠大脑ATPase活性的影响

4.1.5 DEHP对小鼠睾丸ATPase活性的影响

4.2.DEHP对小鼠脏器线粒体ATP酶活性的影响

4.2.1 DEHP对小鼠肝脏线粒体ATPase活性的影响

4.2.2 DEHP对小鼠心脏线粒体ATPase活性的影响

4.3小结

5.结论

参考文献

附录

致谢