三角褐指藻的收集及从中提取甘油三酯的方法研究

摘要

生物柴油是清洁的可再生能源，是优质的石油柴油代用品，但原料供给的不足和生产成本的高昂始终是制约生物柴油产业发展的重要因素。三角褐指藻是硅藻的模式种类之一，是一种极有开发潜力的优质经济藻种。目前关于该藻的研究很多，主要集中在对影响其生长、繁殖、藻体生化组成及多不饱和脂肪酸（PUFA）积累的影响因子方面，但有关利用它进行生物柴油的研究还很少。据研究报道，三角褐指藻在生长至对数期后可自身积累甘油三酯，提取甘油三酯后经甲酯化即可转化为生物柴油，因此是生物柴油潜在的优势原料之一。然而，如何简单、快速且低成本的进行大规模收集藻细胞是首要解决的问题，同样对所含甘油三酯的提取也是其中关键的研究之一，这两方面的工作是其最重要的研究内容，也是研究的难点。 本研究的内容和结果如下： 1.本文对三角褐指藻的生长情况及甘油三酯含量受温度的影响进行了研究，结果表明20℃培养时细胞生长速度最快，而甘油三酯含量受温度影响变化不明显。 2.在综述目前常用的微藻收集方法的基础上，对三角褐指藻的大规模收集方法进行探究，找到了一种快速、简单、低廉的方法，即采用絮凝法收集藻细胞。本文着重研究了硫酸铜、硫酸锌、硫酸镁、氯化铁和有机高分子阴离子型絮凝剂聚丙烯酰胺（AGEFLOC WT652）等几种絮凝剂对藻细胞的絮凝效率，最终优化了使用氯化铁和AGEFLOC WT652相结合对其进行高效絮凝采收的方法，为大规模养殖三角褐指藻的细胞收集工作提供了有益借鉴。 3.在对文献进行综合分析研究及本研究室所能提供的实验条件基础上，采用索式提取和超声波辅助提取这两种方法提取了三角褐指藻细胞内的甘油三酯。结果表明超声波辅助提取方法较优，提取效率可达细胞干重的27％。

目录

文摘

英文文摘

声明

1文献综述

1.1生物柴油概述

1.1.1生物柴油的特点

1.1.2生物柴油的国内外生产现状

1.1.3生物柴油的原料来源

1.1.4我国发展生物柴油的意义

1.2微藻概述

1.2.1三角褐指藻简介

1.2.2微藻的开发研究进展

1.2.3微藻生产生物柴油的现状

1.3微藻的收集方法

1.3.1离心法

1.3.2超滤法

1.3.3气浮法

1.3.4絮凝法

1.4从微藻中提取油脂的方法

1.4.1机械压榨法

1.4.2有机溶剂法

1.4.3超临界流体萃取法

1.4.4 超声波辅助提取法

1.4.5酶提取法

1.4.6渗透震扰法

2三角褐指藻的培养

2.1材料与方法

2.1.1藻种及培养条件

2.1.2尼罗红染色

2.1.3总脂的提取

2.1.4薄层层析分析

2.2结果

2.2.1生长情况

2.2.2染色结果

2.2.3甘油三酯的含量

2.3讨论

3三角褐指藻的絮凝采收

3.1材料与方法

3.1.1藻种及培养条件

3.1.2无机低分子及AGEFLOC WT652诱导藻细胞絮凝

3.1.3 FeCl3与AGEFLOC WT652共同诱导藻细胞絮凝

3.1.4 NaOH和AGEFLOC WT652共同诱导藻细胞絮凝

3.1.5絮凝条件的优化

3.1.6絮凝效率的计算

3.2结果

3.2.1无机盐及AGEFLOC WT652的絮凝实验

3.2.2 FeCl3与AGEFLOC WT652共同诱导的絮凝

3.2.3 NaOH和AGEFLOC WT652共同诱导的絮凝

3.2.4藻液pH值和细胞密度对絮凝的影响

3.3讨论

4三角褐指藻甘油三醋的提取

4.1材料与方法

4.1.1藻种

4.1.2甘油三酯的提取

4.1.3脂肪酸组成分析

4.2结果

4.2.1提取方法对甘油三酯提取效率的影响

4.2.2脂肪酸组成

4.3讨论

本研究使用的主要仪器设备

参考文献

在校期间撰写和发表的论文

致 谢