邻苯二甲酸二异壬酯皮肤暴露对小鼠过敏性皮肤炎症的影响

摘要

邻苯二甲酸二异壬酯(diisononyl phthalate，DINP)因其具有更好的抗老化性能，抗迁移性能，抗萃取性能，更高的耐高温性能，而被当作一种增塑剂广泛的应用于塑料、树脂溶剂、建材、润滑剂、胶黏剂、化妆品、印刷油墨等领域。DINP与材料分子通过氢键或者范德华力非共价结合，在产品的生产、使用和废弃过程中扩散到环境中，随着消化道摄入、呼吸道吸入、皮肤接触等途径进入人体。流行病学调查及实验室研究表明，环境中邻苯二甲酸酯类(phthalate esters，PAEs)持续地暴露可以通过类似免疫佐剂的作用增加过敏性皮炎的发病几率及严重程度。DINP对生态环境无害而被广泛的应用于个人护理产品和儿童玩具中。因而它的毒性需要进行严格的监控，尤其是长期的皮肤暴露带来的危害。理清其中的分子机制对于研究它的毒性必不可少。
　　在本研究中，用异硫氰酸荧光素(FITC)作用于小鼠上来建立Th2型接触性超敏反应小鼠模型，以此来模拟真实环境中的特应性皮炎，通过检测小鼠皮肤长期涂抹DINP引起过敏性接触皮炎(CHS)症状加剧过程来模拟人体皮肤持续接触DINP造成接触性皮炎(AD)加重过程，并探明此过程中潜在的分子机理。将Balb/c雄性小鼠背部毛发剪去，每天涂抹一定量（依小鼠体重而定）的生理盐水或者1.4、14、140 mg/kg浓度的DINP，共涂抹40天。同时，一部分对照组和高浓度染毒组小鼠每天灌喂30mg/kg的褪黑素(MT)。在第41和42天时，用120μL的对照溶剂（1∶1丙酮/DBP）或者将0.5％FITC的致敏液涂抹于小鼠的腹部。第47天早上，在小鼠右耳涂抹20μ L对照溶剂或0.5％FITC溶液进行激发，小鼠左耳涂抹对照溶剂进行对照。实验结果显示，小鼠皮肤连续40天涂抹DINP（14和140 mg/kg.d），再用过敏原进行刺激，小鼠出现CSH症状，并且比DINP未出现时的症状更严重。抗氧化剂褪黑素在抵抗氧化应激水平的同时，还可以减弱皮炎症状。这些可以通过实验结果反应出来:(1)患CHS的小鼠右耳严重肿胀;(2)患CHS的小鼠右耳Th2细胞因子(IL-4、IL-5)含量增加;(3)小鼠血清中T-IgE的总量上升;(4)肿胀部位氧化因子ROS、MDA含量及GSH损耗增加;(5)加入MT的小鼠，皮肤肿胀程度降低，肿胀部位Th2细胞因子(IL-4、IL-5)分泌降低，小鼠血清中T-IgE的总量减少，肿胀部位氧化因子ROS、MDA含量及GSH损耗降低。
　　总之，皮肤持续接触PEAs类环境毒素，会对人或者动物产生不良的影响，甚至使其变为易感染体质，使得过敏原在诱发过敏反应的时候产生更加强烈的反应，如过敏性皮炎。抗氧化剂褪黑素可以缓解特应性皮炎症状，以此推断氧化应激是DINP加重过敏性皮炎过程中重要的分子机制，据此可以为过敏性疾病的治疗指引正确地方向。