声明
摘要
1．1昆虫免疫系统
1．1．1体液免疫
1．1．2细胞免疫
1．2包囊反应
1．3吞噬反应
1．4 20-羟基蜕皮酮
1．5棉铃虫
1．6害虫防治
1．7研究背景及意义
2．1实验材料
2．1．1棉铃虫
2．1．2白兔
2．1．3线虫
2．1．4菌株
2．1．5试剂、药品
2．1．6仪器与设备
2．1．7常用试剂及培养基的配置
2．1．8实验用到的引物序列
2．2实验方法
2．2．1中华卵索线虫寄生棉铃虫实验
2．2．2寄生中华卵索线虫的棉铃虫血细胞吞噬细菌实验
2．2．3寄生中华卵索线虫的棉铃虫血浆抗菌活性测定实验
2．2．4 HaCTL1b基因全长、信号肽编码蛋白序列分析
2．2．5棉铃虫各组织RNA的提取
2．2．6合成cDNA第一链(TRANS Easy Script One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix)
2．2．8 HaCTL1b基因的原核重组表达与纯化
2．2．9 HaCTL1b抗体的制备
2．2．10用Western blot进行抗体检测
2．2．12 Western blot检测HaCTL1在棉铃虫不同发育时期的蛋白表达模式
2．2．13 rHaCTL1b的凝集和结合实验
2．2．14 E．coli和S．aureus刺激HaCTL1的表达实验
2．2．15 HaCTL1的RNA干扰实验
2．2．16检测HaCTL1敲降后对血细胞包囊率的影响
2．2．19检测HaCTL1敲降后对血细胞吞噬率的影响
3．结果与分析
3．1中华卵索线虫寄生对棉铃虫存活率的影响
3．2中华卵索线虫寄生对棉铃虫免疫应答的影响
3．3棉铃虫HaCTL1b基因的鉴定与生物信息学分析
3．4 rHaCTL1b的表达与纯化
3．4．3重组蛋白rHaCTL1b的表达与纯化
3．6 HaCTL1的组织特异性表达模式分析
3．7 HaCTL1在不同发育阶段的表达分析
3．8 20E诱导HaCTL1的表达
3．9 Beads刺激诱导HaCTL1表达
3．10 HaCTL1促进血细胞包囊
3．11 rHaCTL1b促进细菌凝集
3．12 rHaCTL1b与细菌结合活性分析
3．13细菌刺激诱导HaCTL1基因和蛋白的表达
3．14孵育rHaCTL1b促进血细胞吞噬率
3．15敲降HaCTL1降低血细胞吞噬率
4．讨论
5．小结与展望
参考文献
攻读硕士期间论文发表情况
致谢
