摘要
Abstract
1前言
1.1微生物细胞表面展示研究进展
1.1.1微生物细胞表面展示的涵义
1.1.2微生物细胞表面展示的种类
1.1.3微生物细胞表面展示的应用现状及前景
1.2 S层蛋白展示体系
1.2.1 S层的结构
1.2.2 S层蛋白的化学组成
1.2.3编码S层蛋白的基因
1.2.4 S层的功能与应用前景
1.2.5 S层蛋白展示
1.2.6芽孢杆菌的S层
1.3研究目的和意义
2材料和方法
2.1实验材料
2.1.1 菌株
2.1.2质粒
2.1.3 PCR的引物
2.1.4培养基
2.1.5试剂及仪器
2.2实验方法
2.2.1大肠杆菌质粒的提取
2.2.2苏云金杆菌质粒的提取
2.2.3苏云金杆菌总DNA的提取
2.2.4琼脂糖凝胶电泳分离的DNA的回收
2.2.5 PCR扩增
2.2.6探针制备及杂交
2.2.7大肠杆菌的常规转化
2.2.8苏云金杆菌的电转化
2.2.9蛋白的SDS-PAGE
2.2.10锥虫蓝染色法检测α-淀粉酶的活力
2.2.11碘液法测定α-淀粉酶的活力
2.2.12 Ni-NTA-琼脂糖微球表面吸附实验
2.2.13镉离子吸附试验
3结果与分析
3.1融合蛋白SLH/AMYLASE的表面展示
3.1.1含融合基因slh/amylase的重组质粒pSA-304的构建
3.1.2重组质粒及帮助质粒电转入苏云金杆菌无晶体突变株BMB171
3.1.3融合蛋白SLH/AMYLASE在重组菌的表面表达及其表面活性
3.2融合蛋白SLH/SMTA的表面展示
3.2.1含融合基因slhsmtA的重组质粒pSM-304的构建
3.2.2重组质粒及帮助质粒电转入苏云金杆菌无晶体突变株BMB171
3.2.3融合蛋白SLH/SMTA在重组菌的表面表达及其表面活性
3.3苏云金杆菌T02菌株S层基因缺失突变株的构建
3.3.1质粒p869电转入T02菌株
3.3.2 T02菌株S层基因缺失突变株的筛选
4小结与讨论
参考文献
致谢
