鸡可食组织和蜂产品中硝基咪唑类药物残留检测的HPLC研究

摘要

硝基咪唑类药物具有抗原虫和抗菌活性，我国农业部规定其在动物性食品中残留限量为零。为监测动物性食品中硝基咪唑药物残留，本研究以外标法为定量手段，①建立地美硝唑(DMZ)及其代谢物羟基地美硝唑(DMZOH)在鸡可食组织中的残留的HPLC法，研究DMZ和DMZOH的消除规律。②建立蜂产品中洛硝哒唑(RNZ)、甲硝唑(MNZ)、地美硝唑(DMZ)、奥硝唑(ONZ)、替硝唑(TNZ)多残留的HPLC法。 DMZ和DMZOH在鸡可食组织中残留的HPLC法取鸡组织(肌肉、肝脏、肾脏、脂肪)匀浆，加无水硫酸钠和二氯甲烷振荡提取，取有机层浓缩，残余物加水溶解，正己烷去脂，取水层过C18SPE柱，甲醇洗脱，HypersilODS2色谱柱分离，流动相为水-甲醇(86：14，v/v)，320nm紫外检测。结果显示，测定鸡4种组织中DMZ及DMZOH的最低检测限和最低定量限均为1.0μg/kg，组织中添加DMZ和DMZOH浓度为4.0μg/kg、2.0μg/kg、1.0μg/kg时，肌肉中的平均回收率分别在56.9％～76.5％之间；肝脏中在63.3％～72.6％之间；肾脏中在64.2％～73.3％之间；脂肪中在63.5％～75.7％。日内变异系数均小于16％，日间变异系数均小于15％。按DMZ剂量为250mg/kg.b.w饲喂鸡饲料，连续5d，于停药后第0、1、3、5、7、10、14、21、28d采样检测。检测结果表明，肝脏、肾脏中残留量高于肌肉、脂肪，且维持时间长。但14d后，各组织均未检出药物。 RNZ、MNZ、DMZ、ONZ、TNZ在蜂蜜和蜂王浆中多残留的HPLC法蜂王浆样品用盐酸溶解，氯化钠沉淀杂质，正己烷去脂，而蜂蜜样品仅用盐酸溶解稀释样品；取酸层加磷酸氢二钾15g，二氯甲烷萃取，盐酸反萃，过SCXSPE柱，0.5moL/L的磷酸氢二钾溶液(pH8.8)洗脱，洗脱液用二氯甲烷萃取，HypersilODS2色谱柱分离，流动相为水-乙腈(90：10,v/v)，320nm紫外检测。结果表明，蜂蜜和蜂王浆中RNZ、MNZ、DMZ、ONZ、TNZ的最低检测限和最低定量限均为1.0μg/kg，样品中添加RNZ、MNZ、DMZ、ONZ、TNZ浓度为4.0μg/kg、2.0μg/kg、1.0μg/kg时，其平均回收率范围各自为59.2％～70.6％和54.9％～69.1％，变异系数分别小于18％和16％。 本研究在国内首次建立硝基咪唑类药物在蜂蜜和蜂王浆中残留检测的RP-HPLC方法，灵敏度达到1μg/kg，准确度和精密度均符合我国农业部兽药残留分析方法的要求，在国内同类研究中处于领先地位。 地美硝唑在鸡体内的消除规律的研究检测限也达到1μg/kg，为实际生产中更好的监控地美硝唑的应用提供了参考。

目录

摘要

缩略语表

1前言

1.1硝基咪唑类药物的化学结构和理化性质

1.2硝基咪唑类药物的药理作用

1.3毒副作用

1.3.1一般毒性作用

1.3.2特殊毒性作用

1.4国内外残留检测研究进展

1.4.1国内外蜂产品残留检测研究现状

1.4.2国内外硝基咪唑类药物残留检测研究现状

1.5研究的目的和意义

1.6研究内容

2鸡组织中地美硝唑及其代谢物残留检测方法的建立

2.1材料与方法

2.1.1试验材料

2.1.2试验方法

2.2结果

2.2.1色谱条件

2.2.2最低检测限和最低定量限

2.2.3标准曲线

2.2.4准确度和精密度

2.2.5稳定性

2.2.6动物试验

2.3讨论

2.3.1色谱条件的选择

2.3.2样品提取

2.3.3同国内外方法的比较

3蜂产品中硝基咪唑类药物残留检测方法的建立

3.1材料与方法

3.1.1试验材料

3.1.2试验方法

3.2结果

3.2.1色谱条件

3.2.2最低检测限和最低定量限

3.2.3标准曲线

3.2.4准确度和精密度

3.2.5稳定性

3.3讨论

3.3.1色谱条件的选择

3.3.2蜂产品的制备与保存

3.3.3样品提取

3.3.4样品净化

3.3.5同国内外方法的比较

4残留检测方法的发展趋势

5结论

参考文献

致谢

附录