澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br的组织培养研究

摘要

澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br是草海桐科草海桐属的优良花木,国内外尚未见关于其组织培养方面的报道。
　　本文以叶片、叶柄、茎段、茎节为外植体,通过直接再生和间接再生两种途径,系统的研究了其离体培养中所涉及的多种重要的影响因素,建立了S.nitida组培再生技术体系。主要结果如下:
　　(1)叶片外植体表面消毒,先用75％的酒精消毒30 s,然后分别用不同浓度的NaClO和HgCl2消毒不同时间,结果表明以0.1％HgCl2消毒10 min效果最佳。
　　(2)不同浓度的6-BA和NAA对出芽率、平均出芽数、平均芽高的影响均达到极显著水平,两者的交互作用没有显著影响,MS+1.5mg/L6-BA为诱导叶片直接再生不定芽的较合适培养基。
　　(3)研究了pH、6-BA浓度、2,4-D浓度和外植体类型对愈伤组织诱导的影响。结果表明,当pH值为6.4,培养基为MS+0.5mg/L6-BA+1.5mg/L2,4-D,外植体为叶柄时,诱导愈伤组织的效果最好,诱导率可达92.22％,且愈伤组织为黄绿色,疏松颗粒状。
　　(4)不同6-BA和NAA浓度组合对愈伤分化影响的研究表明,MS+0.5 mg/L6-BA+0.05mg/L NAA为诱导愈伤分化的最佳培养基,愈伤分化率可达64.45％,平均诱导数可达到1.26个。
　　(5)6-BA浓度、NAA浓度以及两者交互作用都对腋芽增殖存在显著影响,MS+1.0mg/L6-BA+0.05mg/L NAA为腋芽增殖的最佳培养基,有效不定芽产生较多,平均芽长达到1.41cm。
　　(6)蔗糖含量和有机物质含量对壮苗培养均存在极显著影响,最佳壮苗培养基为MS+3％蔗糖+15ml/L的100×有机养分母液。
　　(7)NAA对生根影响的实验结果表明,当培养基为1/2MS+3％蔗糖+0.1mg/L6-BA+0.3mg/L NAA,并以珍珠岩代替琼脂时,生根率可达92.22％,平均生根数6.02条,平均根长3.88cm,且根较粗壮。
　　(8)蔗糖含量、大量元素含量、NAA浓度、IBA浓度对组培苗生根影响的正交试验结果表明,蔗糖含量、大量元素含量、NAA浓度对平均生根数和平均根长存在显著影响,当培养基为1/4MS+3.5％蔗糖+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA和1/4MS+3％蔗糖+0.2mg/L NAA+1.5mg/L IBA时,生根率分别可达到92.22％和91.11％,平均生根数分别为3.01条和2.83条,平均根长分别为2.62cm和2.10cm,并且毛细根都较多。对于工厂化育苗来说,以叶片为外植体,通过直接再生途径,到最后获得健壮的移栽苗一共需要130d,是获得大量无菌苗和栽培苗的最佳途径。

目录

摘要

Abstract

1 前言

1.1 植物组织培养的概况及其应用

1.2 扇子花及相关研究概述

1.2.1 扇子花概述

1.2.2 国内外研究进展

1.3 本研究的目的与意义

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.2.1 培养条件

2.2.2 无菌体系的建立

2.2.3 叶片直接再生试验

2.2.4 叶片间接再生试验

2.2.5 腋芽增殖试验

2.2.6 壮苗试验

2.2.7 生根试验

2.2.8 组培苗炼苗移栽

2.3 测定指标

2.4 数据分析

3 结果与分析

3.1 不同消毒方式的消毒效果

3.2 6-BA和NAA浓度对叶片诱导不定芽的影响

3.3 间接再生

3.3.1 pH值、6-BA浓度、2,4-D浓度和外植体对愈伤诱导的影响

3.3.2 6-BA和NAA浓度对愈伤组织分化的影响

3.4 6-BA和NAA浓度对腋芽增殖的影响

3.5 壮苗试验

3.5.1 蔗糖含量对壮苗的影响

3.5.2 有机物质含量对壮苗的影响

3.6 生根试验

3.6.1 NAA浓度对生根的影响

3.6.2 蔗糖、大量元素、NAA和IBA浓度对生根的影响

4 结论与讨论

4.1 结论

4.2 有关褐化问题的探讨

4.3 有关激素应用的探讨

4.4 有关玻璃化的探讨

4.5 生根及驯化移栽方面的探讨

4.6 S.nitida的其他繁殖途径

4.7 组织培养过程中光源的探讨

4.8 组织培养过程中的顽拗现象探讨

参考文献

图版

致谢