中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导、保存及植株再生研究

摘要

本研究以中国李（Pr unus salicina）品种‘Nubiana’试管苗叶片和叶柄为材料，通过对基本培养基、激素种类及浓度配比、琼脂浓度、培养条件及外源添加物的研究，初步建立了中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导、保存及植株再生体系；研究了激素种类及浓度配比、培养条件对叶柄培养与植株再生的影响。主要研究结果如下：
　　 1、中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导的适宜外植体类型为叶片和叶柄。
　　 2、以叶片和叶柄为外植体，诱导中国李‘Nubiana’愈伤组织的适宜培养基配方为WPM+2，4-D2.0mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1+葡萄糖30.0g·L-1+琼脂5.0g·L-1:选取叶龄为28d左右的试管苗叶片叶柄，暗培养28d。
　　 3、中国李‘Nubiana’愈伤组织保存适宜的培养基配方为LP+2,4-D1.0mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1+蔗糖40.0g·L-1+CH0.4g.L-1+琼脂6.0g·L-1；21d左右继代一次，持续暗培养保存。
　　 4、中国李‘Nubiana’愈伤组织植株再生适宜的培养基配方为WPM+NAA0.5mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1+TDZ2.0mg·L-1+蔗糖30.0g·L-1+琼脂6.8g·L-1，光下培养，再生率为6.7％。
　　 5、中国李‘Nubiana’叶柄培养及植株再生的适宜培养基为WPM+TDZ0.5mg·L-1+蔗糖30.0g·L-1+琼脂6.0g·L-1；选取叶龄为21d左右的试管苗叶柄，暗培养14d，再生率可达35％。中国李‘Nubiana’叶柄再生表现出明显的极性，不定芽一般出现在叶柄的近轴端。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

1 前言

1.1 问题的提出

1.2 李离体培养及遗传转化研究进展

1.2.1 茎尖和茎段培养

1.2.2 胚培养

1.2.3 叶片培养

1.2.4 原生质体培养

1.2.5 遗传转化

1.3 愈伤组织类型及状态调控

1.3.1 影响愈伤组织发生的因素

1.3.2 愈伤组织状态调控

1.4 本研究的目的及意义

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.2.1 中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导

2.2.2 中国李‘Nubiana’愈伤组织保存

2.2.3 中国李‘Nubiana’愈伤组织植株再生

2.2.4 中国李‘Nubiana’叶柄培养与植株再生

2.3 试验观察结果及数据统计方法

2.3.1 中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导

2.3.2 中国李‘Nubiana’愈伤组织保存

2.3.3 中国李‘Nubiana’愈伤组织植株再生

2.3.4 中国李‘Nubiana’叶柄培养与植株再生

3 结果与分析

3.1 中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导

3.1.1 外植体对中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导的影响

3.1.2 中国李‘Nubiana’愈伤组织生长状况

3.1.3 激素种类对中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导的影响

3.1.4 激素浓度配比对中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导的影响

3.1.5 暗培养时间对中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导的影响

3.1.6 叶龄对中国李‘Nubiana'愈伤组织诱导的影响

3.1.7 琼脂浓度对中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导的影响

3.2 中国李‘Nubiana’愈伤组织保存

3.2.1 中国李‘Nubiana’愈伤组织保存时愈伤组织生长状况

3.2.2 基本培养基、激素浓度及配比、碳源及氮源对中国李‘Nubiana’愈伤组织保存的综合影响

3.2.3 暗培养时间对中国李‘Nubiana’愈伤组织保存的影响

3.2.4 琼脂浓度对中国李‘Nubiana’愈伤组织保存的影响

3.2.5 继代时间对中国李‘Nubiana’愈伤组织保存的影响

3.3 中国李‘Nubiana’愈伤组织植株再生

3.3.1 外源添加物对中国李‘Nubiana’愈伤组织植株再生的影响

3.3.2 激素浓度配比对中国李‘Nubiana’愈伤组织植株再生的影响

3.4 中国李‘Nubiana’叶柄培养与植株再生

3.4.1 中国李‘Nubiana’叶柄培养与植株再生

3.4.2 激素浓度配比对中国李‘Nubiana’叶柄培养与植株再生的影响

3.4.3 叶龄对中国李‘Nubiana’叶柄培养与植株再生的影响

3.4.4 琼脂浓度对中国李‘Nubiana'叶柄培养与植株再生的影响

4 讨论

4.1 激素对中国李‘Nubiana’愈伤组织培养的影响

4.2 光照培养对中国李‘Nubiana’愈伤组织培养的影响

5 小结

参考文献

图版和图版说明

致谢

附录Ⅰ 几种基本培养基配方

附录Ⅱ 课题资助项目

附录Ⅲ 硕士期间已接收论文