百日草优良自交系离体保存和种子超低温贮藏

摘要

百日草（Zinnia elegans）为一年生草花，许多栽培品种都是由墨西哥的野生种培育而来，经过选育出的优良品种多采用种子保存，种子随保存时间的延长，活力会不断下降，这就要求不断的田间播种以更新种子活力。通过组织培养保存和超低温保存可以较好的克服这个缺点。本试验以课题组培育的3个优良自交系S5、J9、J10为材料，通过组织培养和超低温方法保存无菌苗和种子材料，探讨了百日草组织培养保存体系及适合种子超低温贮藏的方法，以期为百日草优良自交系保存提供理论和实践依据。本试验得出的结论如下：
　　（1）组织培养保存：采用百日草成熟种子进行以苗繁苗的无菌培养，消毒过程采用二次消毒法。首次消毒先用70％的酒精处理1min，之后用0.6%NaOCl消毒20min，剥去果皮后进行第二次消毒，用0.6%NaOCl消毒5min，接种在MS培养基上，发芽率可达80.0%。无菌发芽最适合的培养基为MS，蔗糖含量为30g/L，14h/10h的光照培养条件。百日草在不加任何激素的MS培养基上就可以增殖2.5倍，虽然BA对增殖有较显著的影响，但植株生长状态不佳。生根培养基采用不加任何激素的MS即可，移栽成活率达90%以上。在延缓生长试验中，MS+6mg/L PP333+15g/L Sucrose可以有效的延长继代时间达3个月之久。
　　（2）超低温保存：采用正交设计试验，以自交系S5的种子为试验材料对影响超低温保存效果的主要影响因素(含水量，冰冻保护剂，冷冻和解冻)进行了分析，初步建立了百日草种子超低温保存的方法：通过控制干燥时间，使供试种子的含水量为5.54%，加入10%的二甲基亚砜作为冰冻保护剂，在0℃环境下停留45min，然后直接放入-80℃的超低温冰箱，在流水下解冻。试验证明了冰冻保护剂的重要性，经过最佳方案超低温贮藏的种子发芽率明显高于对照种子，且发芽指数和活力指数与对照无差异。用该方案贮藏J9和J10，同样得到了理想的结果，说明该方法适合百日草种子进行超低温贮藏。

目录

声明

英文缩略表

1前言

1.1种质资源保存的研究进展

1.1.1 组织培养保存

1.1.2超低温保存

1.2组织培养保存技术研究进展

1.2.1 基因型

1.2.2 外植体种类

1.2.3改变培养的物理环境

1.2.4基本培养基养分水平的调整

1.2.5加入生长抑制物质和高渗透压物质

1.3超低温保存技术研究进展

1.3.1超低温保存的理论依据

1.3.2影响超低温保存效果的因素

1.4本研究的目的与意义

1.5本研究的立项依据与技术路线

1.5.1研究背景

1.5.2技术路线

2材料与方法

2.1试验材料

2.2试验方法

2.2.1百日草优良自交系组织培养保存

2.2.2百日草优良自交系种子的超低温保存研究

3结果与分析

3.1百日草优良自交系组织培养保存结果分析

3.1.1消毒时间对种子消毒效果的影响

3.1.2培养基种类对种子发芽的影响

3.1.3继代增殖培养

3.1.4不同的多效唑浓度对继代时间的影响

3.1.5百日草无菌苗的生根

3.1.6百日草无菌苗的移栽

3.2百日草种子的超低温保存研究

3.2.1种子脱水时间与含水量的关系

3.2.2超低温贮藏试验对种子各项指标的影响

3.2.3不同的冷源贮藏对种子发芽率的影响

3.2.4三个不同自交系的超低温贮藏试验

4 讨论

4.1百日草优良自交系组织培养保存

4.2百日草优良自交系种子的超低温保存研究

参考文献

图版与说明

致谢