SSR标记鉴定双低甘蓝型油菜杂交种纯度

摘要

随着分子生物学的发展，分子标记技术已广泛应用于各类作物的纯度鉴定。本实验室前人筛选了3对在几种双低甘蓝型油菜杂交种双亲中呈共显性且多态性良好的SSR标记引物(SSR83，SSR660，SSR740)，但未做相应的田间鉴定比较分析，本实验旨在通过将田间鉴定结果和SSR标记鉴定结果进行比较，判断上述3个标记用于纯度鉴定的准确性。
　　 利用本实验室开发的3对SSR标记引物，鉴定12份杂交油菜种子样品纯度，统计父本率、不育株率、可育株率及纯度。同时，每份样品进行田间种植。花期进行育性调查，统计可育植株的比率。将SSR标记鉴定结果与田间鉴定结果进行统计分析。将两种鉴定方法的结果进行回归分析，以及成对数据T测验分析。将编号4-12的9份样品两种鉴定方法的结果进行方差分析，以比较两种鉴定方法之间的差异。
　　 主要结果如下：
　　 1.对12份油菜种子进行了SSR标记纯度鉴定；鉴定结果显示，检测样品整体纯度较好，总体合格率为83%。除编号2外，其余11份样品中都含有父本杂株，且父本比率小于不育株比率，说明，不育株掺杂是杂交种纯度下降的主要原因。
　　 2.对12份油菜杂交种的SSR鉴定结果和田间鉴定结果进行了统计分析。田间鉴定的平均可育株率为94%，室内SSR鉴定的平均可育株率为92%。田间平均可育株率高于SSR鉴定结果。将两组结果数据进行成对平均数比较t检验分析。T测验结果表明，SSR标记鉴定和田间鉴定结果差异不显著，两者的鉴定能力没有显著差别。
　　 3.经回归分析，得到两种鉴定方法之间的线性回归方程：y=56.4x+42.2(t=3.28**)。利用回归方程，可以根据SSR标记鉴定结果估算田间的鉴定值。
　　 4.田间鉴定结果方差分析显示，组合9A×2-3与组合9A×2-7差异显著，与组合11A×2-1差异极显著；组合9A×2-7和组合11A×2-1差异显著；3个组合品种可育株率有真实差异存在。SSR鉴定结果方差分析显示，组合9A×2-3与组合11A×2-1差异显著。

目录

文摘

英文文摘

缩略语表

1 文献综述

1.1 种子市场现状及种子纯度鉴定的作用

1.1.1 种子市场情况

1.1.2 近几年种子质量抽查情况

1.1.3 种子纯度鉴定的作用

1.2 纯度鉴定的主要方法

1.2.1 形态学鉴定方法

1.2.2 生化鉴定方法

1.2.3 分子标记鉴定方法

1.3 分子标记用于种子纯度鉴定的研究进展

1.3.1 RAPD标记的原理及其在纯度鉴定中的应用

1.3.2 AFLP标记的原理及其在纯度鉴定中的应用

1.3.3 SCAR标记的原理及其在纯度鉴定中的应用

1.3.4 SSR标记的原理及其在纯度鉴定中的应用

1.3.5 四种分子标记比较

1.4 分子标记用于杂交油菜纯度鉴定研究进展

1.5 目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

2.2.1 室内试验

2.2.2 田间试验

2.3 统计分析方法

3 结果与分析

3.1 三个引物在部分杂交种及其亲本的扩增图

3.2 SSR纯度鉴定结果

3.3 十二份样品的SSR标记鉴定结果与田间鉴定结果

3.3.1 两种鉴定方法所得结果的成对数据比较

3.3.2 两种鉴定方法所得结果的回归分析

3.3.3 九份样品两种鉴定方法所得结果的方差分析

4 讨论

4.1 SSR标记纯度鉴定结果

4.2 两种方法鉴定结果的比较分析

4.3 两种鉴定方法所得结果差异产生的原因及对策

4.3.1 表型受基因环境共同作用控制

4.3.2 田间出苗率的影响

4.3.3 田间鉴定的局限性

4.3.4 分子标记鉴定的局限性

4.3.4 减小两种鉴定方法差异的解决方法

参考文献

致谢