通过豚鼠模型评价副猪嗜血杆菌MF59佐剂灭活疫苗免疫效力的研究

摘要

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis, HPS）是猪格拉瑟氏病（Gl?sser’s disease）的病原菌，引起猪脑膜炎、多发性浆膜炎与关节炎。预防和控制该病的主要措施为灭活疫苗接种，我国HPS灭活疫苗佐剂主要为白油佐剂，国外为氢氧化铝佐剂。为了进一步优化副猪嗜血杆菌灭活疫苗，本研究以 MF59为免疫佐剂分别制备了副猪嗜血杆菌SH0165（血清5型）和MD0322（血清4型）水包油型（O/W）单价灭活疫苗，并以豚鼠为感染模型对疫苗免疫效力进行了评价。具体研究内容如下：
　　1、副猪嗜血杆菌MF59佐剂单价灭活疫苗的制备与检验
　　以角鲨烯为油相、Span85和Tween80为表面活性剂实验室制备了MF59佐剂，按照1:1的佐剂抗原比例分别制备了SH016和MD0322水包油型单价灭活疫苗。疫置于4℃和室温6个月无分层、破乳和沉淀现象，稳定性良好。
　　2、SH0165和MD0322豚鼠绝对致死剂量的测定及攻毒途径的比较
　　本研究以豚鼠为感染模型，采用胸腔感染和腹腔感染途径分别测定了 SH0165和MD0322豚鼠的绝对致死量（LD100），并对两种攻毒途径进行了比较。通过比较认为胸腔感染途径可更加稳定的复制出脑膜炎、胸腔内纤维素性渗出、浆液性渗出物覆盖心肺表面等副猪嗜血杆菌病典型病变。
　　3、副猪嗜血杆菌MF59佐剂灭活疫苗免疫效力评价
　　疫苗保护力试验、抗体水平检测、临床剖检、组织病理学观察以及HPS豚鼠病变评分5个试验综合评价认为MF59佐剂和白油佐剂制备的灭活疫苗对豚鼠的保护效力无显著性差异。通过对疫苗免疫部位肌肉组织的临床剖检和组织病理学观察，发现MF59佐剂疫苗免疫部位肌肉与正常肌肉无任何差异；而白油佐剂疫苗免疫部位出现红肿、溃疡现象，病理学观察表现为肉芽肿、结缔组织增生、多核巨细胞和巨噬细胞浸润等现象。因此，综合以上试验结果认为MF59具有成为优化HPS灭活疫苗候选佐剂的潜力。

目录

声明

缩略语表 (ABBREVIATION)

1 文献综述

1.1 免疫佐剂

1.2 副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂概述

1.3 MF59佐剂

1.4 副猪嗜血杆菌动物感染模型

1.5研究的目的与意义

2.材料和方法

2.1材料

2.2方法

3结果与分析

3.1 MF59佐剂副猪嗜血杆菌O/W灭活疫苗制备与检验

3.2 HPS豚鼠绝对致死剂量的测定及感染途径的比较

3.3 副猪嗜血杆菌MF59佐剂灭活疫苗免疫效力测定

4 分析与讨论

4.1 MF59佐剂副猪嗜血杆菌O/W型单价灭活疫苗稳定性分析

4.2 副猪嗜血杆菌豚鼠病变打分表的建立

4.3 胸腔攻毒途径与腹腔攻毒途径的比较

4.4 MF59佐剂与白油佐剂的比较

5 结论

参考文献

附表

致谢