声明
摘要
缩略语(Abbreviation)
1文献综述
1．1炎症反应
1．2脂多糖与炎症反应
1．3细胞因子
1．3．1肿瘤坏死因子α
1．3．2白介素1β
1．3．3白介素6
1．4核因子-κB
1．5哺乳动物羧酸酯酶
1．6猪肝羧酸酯酶
1．7孕烷受体
1．8糖皮质激素受体
2研究目的与意义
3材料与方法
3．1试验材料
3．1．1载体、试验动物和细胞系
3．1．2主要试剂及配置
3．1．3主要仪器设备
3．1．4主要数据库及分析软件
3．2试验方法
3．2．1猪肝原代细胞的分离及培养
3．2．2蛋白浓度的测定
3．2．3蛋白质免疫印迹(Western blot)
3．2．4 RT-qPCR检测PLE及GR／PXR mRNA水平
3．2．5 PLE1系列长度报告质粒的构建
3．2．6 NF-κB p65／PXR／GR真核表达载体构建
3．2．7去内毒素质粒的提取
3．2．8猪肝传代细胞的培养
3．2．9荧光素酶法测启动子活性
3．2．10统计学分析
4．1促炎介质对PLE表达的调控
4．1．1猪肝原代细胞的分离及培养
4．1．2 CCK-8法检测促炎介质对猪肝原代细胞的毒性
4．1．3不同浓度的促炎介质对猪肝原代细胞PLE水平的影响
4．1．4促炎介质处理猪肝原代细胞不同时长对PLE mRNA水平影响
4．1．5促炎介质对PLE转录水平的调控
4．2促炎介质通过NF-κB信号通路调控PLE的表达
4．2．2 NF-κB过表达试验
4．3促炎介质通过GR／PXR调控PLE的表达
4．3．1不同浓度促炎介质对猪肝原代细胞GR／PXR表达的影响
4．3．2促炎介质处理猪肝原代细胞不同时长对GR／PXR mRNA水平影响
4．3．3 GR对PLE表达的影响
4．3．4 PXR对PLE表达的影响
4．4 NF-κB对猪肝原代细胞GR／PXR表达的影响
5．1猪肝原代细胞的分离及培养
5．2促炎介质对猪肝原代细胞PLE表达的调控
5．4 NF-κB在转录水平上调控PLE的表达
5．5促炎介质通过下调GR及PXR表达间接影响PLE的水平
6结论
参考文献
