声明
摘要
缩略语表(Abbreviation)
1．前言
1．1猪链球菌病
1．1．1病原学
1．1．2流行病学
1．1．3临床症状
1．1．4诊断和治疗
1．1．5预防和控制
1．2双组份调控系统(TCS)
1．2．1猪链球菌中的双组份调控系统
1．2．2 VicK／VicR系统的研究进展
1．3猪链球菌毒力因子的研究进展
1．3．1细菌表面成分
1．3．2表面与分泌蛋白
1．3．3酶类毒力因子
1．3．4蛋白调控因子
2．研究目的与意义
3．实验材料和方法
3．1实验材料
3．1．1菌株、质粒和培养条件
3．1．2主要试剂
3．1．3培养基与抗生素的配制
3．1．4主要缓冲液及其配制
3．1．5主要仪器与设备
3．1．6引物
3．1．7实验动物和实验细胞
3．2实验方法
3．2．1自杀性重组质粒的构建
3．2．2猪链球菌2型基因缺失突变株的构建
3．2．3 CΔvicK互补菌株的构建
3．2．4野生株、突变株和互补菌株的基础生物学特性研究
3．2．5细胞黏附、入侵实验
3．2．6人全血杀菌实验
3．2．7竞争感染实验
3．2．8猪链球菌RNA的提取
3．2．9 RNA-seq
3．2．10荧光定量PCR
3．2．11 VicR蛋白的表达和纯化
3．2．12 EMSA实验
3．2．13统计分析
4．结果与分析
4．1多序列比对
4．2猪链球菌2型vicK基因缺失突变株鉴定
4．3猪链球菌2型vicK基因互补菌株的鉴定
4．4体外生长特性比较
4．4．1形态学比较
4．4．2溶血环观察
4．4．3生长特性比较
4．4．4体外应激反应
4．5突变株AvicK对细胞黏附能力下降
4．6 vicK能促进猪链球菌2型菌株在人全血中的存活
4．7 vicK基因影响猪链球菌2型菌株对仔猪的毒力
4．8差异基因检测
4．9筛选与毒力相关基因
4．10 VicR蛋白的鉴定
4．11 VicR蛋白能够直接调控一些毒力基因的表达
5．讨论
5．1课题的选择
5．3 VicRK双组份系统与猪链球菌2型的致病性
6．结论
参考文献
致谢
