脱唾液酸糖蛋白受体介导的鸡贫血病毒VP3基因靶向性治疗肝癌的研究

摘要

该文首先构建了含CAV的功能性基因VP3及其部分调控序列的真核表达载体pcDNA-vp3.在此基础上,通过阳离子脂质转染试剂LipofectAMINE<'TM>介导的基因转移,在体外将pcDNA-vp3导入多种人源性或鼠源性的肝癌肿瘤细胞系及人二倍体胎肝细胞系中.RT-PCR实验结果表明vp3基因在转化细胞中得以表达.通过流式细胞检测术、原位凋亡检测技术(TUNEL法)及筛选稳定表达细胞株等方法,确定了鸡贫血病毒的确是以凋亡的方式诱导细胞死亡.并且只诱导癌细胞的凋亡,而不诱导正常或二倍体细胞的死亡.构建脱唾液酸糖蛋白-核酸复合物,为实现CAV vp3基因体内肝癌细胞的靶向性基因治疗提供实践和理论基础.利用肝细胞膜表面上特有的脱唾液酸糖蛋白受体,使外源基因可定向导入肝细胞,同时又利用VP3只诱导肿瘤细胞或具有肿瘤倾向细胞凋亡的特性,达到特异杀伤肝癌组织中癌细胞的目的,从而解决长期以来困扰研究者们如何使外源治疗性基因特异杀伤肝肿瘤细胞这一难题.该实验进一步的研究方向是建立合适的人肝癌裸鼠移植瘤模型,研究Asor-PLL-pcDNA-vp3在体内对人源性肝癌细胞的杀伤效应,从而为肝癌的临床前和临床的基因治疗提供相应的理论和实践基础.

目录

一、中文摘要

二、英文摘要

三、关键缩略词

四、论文全文

Ⅰ：第一部分：鸡贫血病毒VP3基因的克隆及vp3基因体、内外凋亡诱导效应的研究

1.摘要

2.前言

3.材料与方法

5.讨论

6.结论

7.参考文献

Ⅱ第二部分：脱唾液酸糖蛋白受体介导的肝细胞靶向性基因转移系统的建立

1.摘要

2.前言

3.材料和方法

4.结果

5.讨论

6.结论

7.参考文献

五、综述

六、在读期间发表论文情况

七、致谢