HBV反基因对HBV复制影响的研究

摘要

目前关于TFO对乙型肝为病毒复制影响的研究只有一篇报道,该研究就此设计一段能与HBV核心启动子SP区(nt1734-1753)形成三螺旋的TFO并标记上生物素,转染HepG2.2.15细胞,检测其转染效率及其与HepG2.2.15细胞中HBV DNA及细胞中HBV RNA水平的影响;并利用裸鼠建立能够稳定分泌HBV的动物模型,初步研究HBV反基因在整体水平上对HBV复制的影响.该实验分为四个部分:第一部分,HBV反基因的设计.目的:测定HepG2.2.15细胞中HVB基因组的部分序列,根据测序结果及TFO设计原则设计出HBV反基因.结论:设计出TFO的序列为5'-CTCCTCCCCCAACTCCTCCC-3',命名为TFO20.第二部分,HBV反基因与HBV DNA的结合情况.目的:比较裸TFO20和脂质体-TFO20复合物转染效率的差别,观察TFO20与HBV DNA结合的情况.结论:TFO20通过脂质体包裹转染可以很好地进入HepG2.2.15细胞中并与HBV DNA结合.第三部分,HBV反基因对HBV复制的体外抑制作用.目的:检测TFO20对HepG2.2.15细胞或培养上清中HBV RNA、HBV DNA、HBsAg水平的影响.结论:脂质体-TFO20复合物在体外能够有效地抑制HBV复制,发挥抗病毒作用.第四部分,HBV反基因对HVB复制的体内抑制作用.目的:检测TFO20在整体水平上对HBV复制的影响.结论:脂质体-TFO20复合物在整体水平上具有一定的抗乙型肝炎病毒作用,但有一定的局部毒性作用.

目录

前言

第一部分HBV部分基因的序列测定及HBV反基因的设计

参考文献

附图

第二部分HBV反基因与HBV DNA的结合情况

参考文献

附图

第三部分HBV反基因对HBV复制的体外抑制作用

参考文献

第四部分HBV反基因对HBV复制的体内抑制作用

参考文献

附图

综述一乙型病毒性肝炎的基因治疗

综述二核苷类似物抗HIV的研究进展

附录一

附录二

致谢