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【6h】

利用非侵入性光学成像技术监测在体肿瘤的生长

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目录

文摘

英文文摘

1绪论

1.1肿瘤成像技术研究进展

1.2绿色荧光蛋白

1.3肿瘤模型

1.4本文研究的主要内容

2绿色荧光蛋白在肿瘤细胞中的稳定表达

2.1转染方法

2.2基因转染实验

2.3筛选绿色荧光蛋白高表达的重组细胞

2.4小结

3绿色荧光蛋白检测细胞的死亡

3.1细胞凋亡和坏死的诱导

3.2细胞死亡检测系统

3.3利用绿色荧光蛋白检测细胞死亡

3.4小结

4利用光学成像技术监测在体肿瘤的生长

4.1肿瘤模型的制备

4.2光学成像系统

4.3利用光学成像技术监测肿瘤的生长

4.4小结

5总结

致谢

参考文献

附录1攻读硕士学位期间发表的论文目录

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摘要

非侵入性地监测在体肿瘤的生长和治疗已经成为肿瘤研究的热点问题,其中早期诊断以及针对治疗后少量残余肿瘤细胞的监测尤为重要.因此,发展无创、高灵敏度、可实时追踪肿瘤生长的监测手段对于整个疗效评价和抗肿瘤新药的快速筛选都至关重要.该文利用基因标记技术,结合光学成像方法,实现了在体肿瘤的实时无损监测.利用电穿孔和脂质体两种基因转染方法对BALB/c小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0细胞进行基因转染.利用流式细胞仪和荧光显微镜,通过GFP荧光变化分析了SP2/0-GFP细胞出热休克和地塞米松等方法引起的细胞死亡,并与PI和Hoechst染色等传统调亡检测方法进行了比较.结果表明,SP2/0-GFP细胞经过死亡处理后GFP荧光大幅下降或丢失,这种基于GFP荧光变化的细胞死亡分析方法与PI和Hoechst染色方法的分析结果具有良好的一致性,并可实时监测细胞的死亡过程.将SP2/0-GFP细胞移植于同系BALB/c小鼠腿部、耳部和腹部等部位,利用光学成像技术跟踪了腿部肿瘤的生长过程、耳部肿瘤血管的生成和腹腔肿瘤的转移情况.该方法不仅可以探测已经成瘤的肿瘤,而且可以检测到早期的少量肿瘤细胞(从注射肿瘤细胞的第一天即可探测到),收集到的荧光随着肿瘤

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