组织因子途径抑制物-2影响人前列腺癌细胞侵袭转移能力的实验研究

摘要

【目的】1.将人组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因成功转染入人前列腺癌细胞株PC3M,筛选获取PC3M-TFPI-2稳定表达株.2.探讨TFPI-2对人前列腺癌细胞体外迁徙侵袭能力的影响.3.建立人前列腺癌细胞体内转移的实验动物模型,研究TFPI-2对人前列腺癌细胞体内侵袭转移能力的影响.4.探讨TFPI-2对人前列腺癌细胞凋亡的影响.【方法】1.应用脂质体介导的基因转移技术将人TFPI-2基因真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2导入人前列腺癌细胞株PC3M中,采用G418筛选途径得到稳定转染的PC3M-TFPI-2细胞,然后分别通过RT-PCR和Western blot技术检测TFPI-2在人前列腺癌细胞中的表达.2.利用先前培养成功的PC3M-TFPI-2组细胞,通过Boyden小室体外侵袭转移模型,以迁徙到PVPF膜上的每个高倍镜视野中的平均细胞数作为评价人前列腺癌细胞迁徙和侵袭能力强弱的指标.3.分别将PC3M-TFPI-2、PC3M-P与PC3M-V三组前列腺癌细胞接种于BALB/c裸小鼠皮下,观察其形成的局部新生物相对体积、组织浸润程度以及有无肝、肺组织的远处转移.4.采用Annexin V/PI法,通过流式细胞仪分别对稳定转染的PC3M-TFPI-2组细胞和未转染的PC3M组细胞进行双参数分析,检测两组细胞的凋亡情况.

目录

主要缩略语

前 言

第一部分TFPI-2基因转染人前列腺癌细胞及其检测

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分TFPI-2影响人前列腺癌细胞体外迁徙侵袭能力的研究

第三部分TFPI-2影响人前列腺癌细胞体内侵袭转移能力的研究

第四部分TFPI-2影响人前列腺癌细胞凋亡的研究

研究小结

附 前列腺癌组织中MMP-2和MMP-9的表达研究

综述一基质金属蛋白酶及其抑制剂与前列腺癌

综述二组织因子途径抑制物-2与肿瘤的侵袭和转移

致谢