电刺激大鼠小脑顶核对缺血再灌注条件下视网膜的保护作用及其机制的研究

摘要

[目的]:对视网膜缺血-再灌注损伤模型大鼠的小脑顶核进行电刺激,通过检测内视网膜厚度比率;观察视网膜细胞超微结构;检测视网膜细胞膜Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力;检测视网膜神经节细胞凋亡率及视网膜细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达,探讨电刺激大鼠小脑顶核(cerebellar fastigial nucleus,CFN)对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制.[方法]:99只大鼠随机均分为三组,缺血-再灌注损伤组、缺血-再灌注治疗组和假手术组.①缺血-再灌注损伤组是通过结扎大鼠视网膜血管和视神经不同时间(30分钟、60分钟或90分钟),再恢复血液灌注6小时制作,其后摘除眼球;②缺血-再灌注治疗组是在缺血-再灌注损伤组的基础上,于再灌注时用脑循环功能治疗仪电刺激大鼠小脑顶核1小时,再恢复血液灌注6小时后摘除眼球;③假手术组大鼠的小脑顶核插入电极,缝线只围绕视网膜血管及视神经但不结扎,分别持续30分钟、60分钟或90分钟后去除缝线,再等待6小时,其后摘除眼球.所有大鼠均取左眼作为检测标本.检测方法如下:(1)用图像分析仪定量内视网膜厚度、视网膜总厚度,计算内视网膜厚度比率改变;(2)通过透射电镜观察视网膜细胞形态和超微结构的变化;(3)用ATP酶试剂盒检测细胞Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力;(4)用TUNEL试剂盒检测视网膜神经节细胞凋亡率;(5)用免疫组织化学染色法检测视网膜细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达.[结论]:电刺激小脑顶核(cerebellar fastigal nucleus,CFN)对视网膜缺血-再灌注损伤具有保护作用,其可能的机制除了前人研究推测的外,还包括通过改善Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力而减低视网膜功能的损害,恢复视网膜形态的改变;通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达来减少视网膜细胞的凋亡.

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综述

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