西罗莫司对人胰腺癌SW1990细胞增殖及mTOR、HIF-1α、VEGF基因抑制作用的研究

摘要

目的：西罗莫司是一种哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的特异性抑制剂，新近研究发现它具有良好的抗肿瘤作用，但其作用机制尚未完全阐明，本实验通过研究西罗莫司对体外培养的人胰腺癌细胞系SW1990增殖及mTOR、HIF-1α、VEGF基因的抑制作用，探讨以mTOR为靶点治疗胰腺癌可能的细胞内信号传导机制。
　　 方法：缺氧条件下体外培养胰腺癌SW1990细胞，外源性给予不同浓度的西罗莫司(0.01 nmol/L-100000 nmol/L)刺激细胞24h，MTT法检测不同浓度药物对胰腺癌细胞增殖的影响。半定量RT-PCR检测西罗莫司对SW1990细胞mTOR、HIF-1α和VEGF mRNA表达的影响。Western blot检测不同浓度的药物刺激后SW1990细胞内mTOR、HIF-1α和VEGF蛋白表达的变化。
　　 结果：西罗莫司可显著抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖，其抑制率随药物浓度的增加而上升。随着西罗莫司作用浓度的增加，SW1990细胞中mTOR和VEGF mRNA的表达水平呈明显下降趋势，实验组与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；而西罗莫司浓度的高低对HIF-1αmRNA的表达量并无明显的影响。西罗莫司能明显的抑制SW1990细胞mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白的表达，在其浓度最大组抑制效应达到最大。
　　 结论：在缺氧条件下，西罗莫司可通过mTOR信号转导途径下调胰腺癌SW1990细胞内HIF-1α蛋白表达，进而抑制VEGF基因的转录，诱导细胞凋亡，这可能是西罗莫司抗肿瘤的机制之一。