甘草次酸对K562白血病细胞增殖活性的影响及其机制的探讨

摘要

目的：研究甘草次酸对慢性白血病急变细胞株K562体外增殖抑制作用，分析其引起细胞周期的变化及探讨其可能的抗癌机制。 方法：培养K562细胞，MTT法检测甘草次酸对K562细胞增殖活性的影响；Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态学改变；流式细胞术分析细胞周期的变化以及cyclinD1和cyclinE蛋白含量的变化；RT-PCR测定细胞中cyclinD1和cyclinE mRNA表达含量的改变。 结果：甘草次酸对K562细胞有增殖抑制作用，该作用表现为量效和时效依赖性，作用48 h的IC50值为（93.1±3.7）μmol/L。甘草次酸可以诱导细胞发生凋亡，Hoechst33258染色可见细胞核内凋亡小体。甘草次酸可以诱导K562细胞周期阻滞于G0/G1期，同时G2/M期细胞比例减小，S期在80μmol/L GA组变化不明显，在100、120μmol/L GA组则显著降低。甘草次酸可以同时下调K562细胞内cyclin D1和cyclin E蛋白和基因的表达，下调作用与剂量呈正相关。 结论：GA能明显抑制K562细胞增殖，并诱导其周期阻滞于G0/G1期。该效应可能与其下调周期蛋白cyclin D1和cyclin E表达有关，有望成为新型抗肿瘤中药。