一氧化氮对梗阻性肾脏疾病非血流动力学保护作用机制的研究

摘要

目的：一氧化氮（Nitric Oxide，NO）是目前研究最多、舒张血管作用最强的一种内皮舒张因子。在梗阻性肾脏疾病中外源性给予NO的前体L-精氨酸（L-Arginine）对肾脏的作用如何，及其可能的非血流动力学作用机制尚不十分清楚。本试验采用单侧输尿管结扎（Unilateral ureteral obstruction，UUO）的方法，建立大鼠肾间质纤维化（Tubulointerstitial fibrosis，TIF）模型，并通过灌胃给予L-Arginine以及腹腔注射一氧化氮合成酶（Nitric oxide synthase，NOS）的抑制剂L-NG-硝基精氨酸甲酯（N- nitro- L- arginine methylester，L-NAME），比较假手术组、模型组、L-Arginine组和L-NAME组各组大鼠梗阻侧肾脏组织形态学的改变、纤维连接蛋白（Fibronectin，FN）和精氨酸合酶Ⅱ（ArginaseⅡ）表达水平的不同，探讨NO对UUO大鼠TIF的作用及其可能的非血流动力学的作用机制。 方法：成熟Sprague-Dawley（SD）雄性大鼠24只，随机分为4组：假手术组（S组）、模型组（M组）、L-Arginine组（A组）、L-NAME组（N组）。M组、A组和N组大鼠行左侧输尿管结扎，S组仅分离左侧输尿管，未行结扎。UUO术后28d处死各组大鼠，应用病理染色技术检测肾组织小管间质损伤指数，免疫组织化学法和RT-PCR技术分别检测肾组织FN和ArginaseⅡMrna的表达。 结果：（1）与S组相比，M组肾小管间质损伤指数增加，差异有统计学意义（P<0.01）；与M组相比，A组肾小管间质损伤指数降低（P<0.01），N组肾小管间质损伤指数增加（P<0.01）。（2）与M组相比，A组肾组织中NO的含量增加，差异有统计学意义（P<0.05）；N组肾组织中NO的含量较M组明显减少（P<0.01）。（3）M组与S组相比,肾小管间质FN的表达升高（P<0.01）；与M组相比，A组肾小管间质FN的表达降低（P<0.01），N组肾小管间质FN的表达增加（P<0.01）。（4）M组与S组相比，肾组织ArginaseⅡMrna的表达升高（P<0.01）；与M组相比，A组ArginaseⅡMrna表达降低（P<0.05），N组ArginaseⅡMrna的表达升高（P<0.01）。 结论：（1）UUO模型大鼠中，外源性给予L-Arginine 后NO生成增加，肾组织损伤减轻，FN表达减低，延缓了TIF的进展；（2）L-Arginine对肾脏的保护作用机制可能与NO和ArignaseⅡ的相互作用有关。