五甲基槲皮素对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制研究

摘要

黄酮类植物多酚一直受到医药界的高度关注,其中对槲皮素(QUE)的研究颇为深入。已经证实的药理作用包括抗肿瘤、抗氧化、抗血小板聚集、抗炎、清除自由基、降压、舒张血管、减轻缺血再灌注损伤等。但QUE的生物利用度低、半衰期短、效价低等缺点限制了其开发利用。
　　多甲基黄酮类是多酚类黄酮的甲基化衍生物,相对于多羟基黄酮类,化学性质更稳定,有利于加工运输、存储等,且生物利用度提高,生物活性更强:包括抗心血管病、调节血脂、抗炎、抗肿瘤、逆转多药耐药性等。五甲基槲皮素(pentamethylquercetin,PMQ)是QUE的衍生物,槲皮素上的五个羟基全部被甲基化。本实验采用经典的Langendorff灌流的离体大鼠心脏,研究PMQ是否具有抗缺血再灌注损伤的作用及可能的作用机制,为该药的深入研究提供实验依据。
　　本文主要从以下几方面进行了论述:
　　第一部分 急性体外给PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制研究
　　目的:研究急性体外给PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制。
　　方法:本实验设立6个组:正常灌流组、模型对照组(缺血再灌注)、溶剂对照组(0.1％DMSO),PMQ三个(3μM、10μM和30μM)剂量组。实验流程:正常灌流组,全程正常灌流120min;模型对照组,正常灌流30min、停灌30min、复灌60min;溶剂对照组和PMQ低、中、高剂量组,正常灌流15min、缺血前处理15min(即在灌流体系内加入溶剂或PMQ)、全心缺血30min(停灌并将心脏浸没在37.5℃生理盐水中)、再灌注60min。全程监测LVDP,定时测量CF。实验结束后迅速切取心尖部心肌约150mg,冰浴中制成匀浆,同批测定SOD活力(黄嘌呤氧化酶法)和MDA含量(硫代巴比妥酸法)。
　　结果:(1)加入PMQ后5min,见LVDP水平升高(P<0.05),故认为PMQ具有短暂迅速的正性肌力效应。(2)PMQ抑制I/R引起的LVDP的下降,但未见浓度依赖性。PMQ30μM能够改善再灌注后的CF(P<0.05)。(3)PMQ10μM和30μM可显著提高心肌SOD活力,PMQ3μM和30μM能够显著降低MDA含量,未见明显的量效关系。
　　结论:(1)PMQ具有正性肌力作用,且起效迅速,维持时间短暂。(2)急性体外给予PMQ对I/R引起的心肌损伤有明显的拮抗作用,其机制可能与其保护内源性抗氧化酶,清除自由基,抑制膜脂质过氧化有关。
　　第二部分 慢性灌胃给PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制研究
　　目的:研究慢性灌胃给PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制。
　　方法:本实验设立4个组:溶剂对照组(DMSO:5%PVP,v:v=1:9),PMQ三个(5mg/kg/d,15mg/kg/d,50mg/kg/d)剂量组。实验流程:提前灌胃7天,第8天实施离体心脏实验。灌流过程:平衡30min、全心缺血(停灌并将心脏浸没在37.5℃生理盐水中)30min、再灌注60min;全程监测LVDP及+dp/dtmax的变化。分别收集各组再灌60min时的冠脉流出液1ml,冻存,同批测定LDH活力。实验结束后,迅速切取心尖部心肌约150mg,冰浴中制成匀浆,同批测定SOD活力(黄嘌呤氧化酶法)和MDA含量(硫代巴比妥酸法)。在PMQ低剂量组,迅速取心尖部心肌约1mm3,经戊二醛固定,电镜检测超微结构的变化。
　　结果:(1)与溶剂组相比,PMQ各剂量组均抑制I/R引起的LVDP和+dp/dtmax下降(P<0.05),无明显量效关系。(2)PMQ各剂量组均提高心肌SOD活力和降低过氧化产物MDA的含量。(3)PMQ各剂量组均降低冠脉流出液中LDH活力(P<0.05),无明显量效关系。(4)PMQ(5mg/kg/d)明显减轻I/R引起的心肌超微结构改变。
　　结论:(1)慢性灌胃给予PMQ对I/R引起的心肌损伤有明显的拮抗作用。(2)其机制可能与其保护内源性抗氧化酶,清除自由基,抑制膜脂质过氧化等有关。

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前言

参考文献

第一部分 急性体外给PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制研究

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 慢性灌胃给PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制研究

材料与方法

实验结果

讨论

参考文献

全文小结

综述

致谢