免疫球蛋白的时间分辨荧光免疫分析方法研究

摘要

时间分辨荧光免疫分析法是使用具有荧光寿命长、荧光发光的 Stokes位移大、特征峰非常尖锐等特点的稀土络合物作为标记物，可以通过延迟测量时间的方法，有效地消除背景荧光的干扰。因此时间分辨荧光免疫分析法具有比其它免疫分析方法更高的灵敏度。 本论文选题于国家自然科学基金课题：基于FRET的量子点标记均相时间分辨荧光免疫分析新方法及其在唐氏综合症产前筛查中的应用。本实验对课题中时间分辨荧光免疫分析方法进行初步实验研究。 本论文研究的主要内容有： 1.对时间分辨荧光免疫分析技术中的关键环节--Eu3+标记抗体技术进行了实验研究，讨论了反应pH值、反应时间及温度、蛋白质浓度、络合剂与抗体的投料比等因素对标记率及蛋白回收率的影响，选出了较佳的反应条件； 2.以小鼠IgG为抗原，羊抗小鼠IgG为抗体，初步建立了竞争时间分辨荧光免疫分析体系，灵敏度达到了1.575ng/ml； 3.尝试合成新型络合剂BBCAP，并研究其与Tb3+络合后的荧光性能。实验证明自制络合剂BBCAP符合应用要求。