NF-kB特异性抑制剂PDTC对急性肝衰竭小鼠肝细胞DNA损伤的影响

摘要

目的：观察NF-kB特异性抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷对急性肝衰竭小鼠血清TNF-a浓度梯度及肝细胞DNA损伤的影响，并探讨其可能的机制。
　　 方法：(1)分组并建立急性肝衰竭小鼠模型：正常SPF 级雄性昆明小鼠65只,随机分为3 大组：正常对照组，D-Gal/L PS模型组,二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)干预组，每大组按时间顺序(0.5h 1h 2h 4h 8h 12h)又随机分6个小组。(2)不同时间点取材和检测:模型组与干预组于各个时间点处死小鼠，检测ALT，用ELISA法检测血清TNF-a浓度,苏木-伊红染色观察肝脏组织损伤情况以对造模效果评估，用彗星实验观察小鼠肝细胞DNA的损伤情况。
　　 结果：(1) 肉眼见模型组肝脏肿胀，表面苍白，失去光泽，肝脏包膜可见见散在点状出血，质偏硬。光镜下对照组肝脏组织结果正常，模型组肝脏组织发生明显病理变化，而干预组则组织损伤比模型组较轻。(2)对照组肝功能正常，模型组在腹腔注射后2h血清转氨酶明显升高(P<0.05)，4h 达峰值，8h 开始下降，12小时仍在较高水平。干预组与模型组2h，4h，8h，12h点相比血清转氨酶降低(P<0.05)。(3)模型组1h血清TNF-a较正常组开始升高(P<005)，2h小时达到峰值，4小时已经下降，8小时仍持续在较高水平。干预组血清2h，4h，8h后TNF-a比模型组降低(P<005)。(4)0.5h后，模型组肝细胞DNA Olive尾矩值有明显增大，1 h出现细胞DNA损伤的肝细胞达100[％]，且Olive尾矩值增大更显著；随注射时间推移，肝细胞DNA Olive尾矩值逐渐增加。干预组1h，2h，4h，8h,12h后肝细胞DNA Olive尾矩值于模型组相比均有不同程度的降低，4h的降低幅度尤为明显，而0.5h时模型组和干预组相比差别没有显著意义。
　　 结论：本实验研究提示PDTC可能通过抑制NF-κB过度激活,减少了TN F-a等前炎症介质或细胞因子过度产生,在一定程度上能减轻了肝细胞DNA的损伤，减缓LPS/D-Gal急性肝衰竭的发生和发展，保留了部分肝功能。