表没食子儿茶素没食子酸酯EGCG对人肝癌细胞株HepG2体外放疗的影响

摘要

目的：研究相同剂量EGCG联合不同剂量放疗对HepG2中hTERT基因表达和细胞凋亡的影响，探讨EGCG成为放疗增敏剂的可能性。
　　
　　 方法：用MTT法检测不同浓度EGCG（10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L）对HepG2细胞增殖的影响；用荧光显微镜检测不同浓度EGCG做HepG2细胞凋亡实验；用实时荧光定量PCR检测不同浓度EGCG对HepG2中hTERT基因的表达的影响，从而找到合适的EGCG剂量用于观察其体外放疗的实验。
　　 用流式细胞仪检测不同剂量放疗（0GY、2GY、4GY、6GY）联合EGCG和不联合EGCG治疗后HepG2细胞凋亡率；用实时荧光定量PCR检测不同剂量放疗（0GY、2GY、4GY、6GY）联合EGCG和不联合EGCG治疗后,HepG2中hTERT基因的表达。放疗用直线加速器6MVX线。
　　 结果：MTT检测结果显示：EGCG抑制HepG2细胞生长，呈浓度依赖关系（R2=0.9558，P<0.05）。荧光显微镜结果显示：EGCG促进HepG2细胞的凋亡，呈浓度依赖关系。实时荧光定量PCR结果显示：10μmol/L组与0μmol/L组比，差异明显（P<0.01）且对hTERT呈上调作用；25μmol/L组与0μmol/L相比差异不明显（P>0.05），50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L组与0μmol/L组相比，均有明显差异（P<0.01）且对hTERT呈下调作用。
　　 根据以上实验结果，选择25μmol/LEGCG进行体外放疗的实验。实时荧光定量PCR结果显示：单用25μmol/LEGCG对HepG2中的hTERT基因并无显著影响，而经2Gy、4Gy、6Gy放射治疗后HepG2中的hTERT基因均有下调作用。0GY组与2Gy、4Gy、6Gy组均有显著性差异（P<0.05）;2Gy组与4Gy组的差异有显著性意义（P<0.05）,2Gy组 与6Gy组的差异有显著性意义（P<0.05）；4Gy组与6Gy组的差异无显著性意义（P<0.05）。提示,2Gy组的差异可能更为显著。
　　 流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示：0GY组与2Gy、4Gy、6Gy组均有显著性差异（P<0.05）;2Gy组与4Gy组的差异有显著性意义（P<0.05）,2Gy组 与6Gy组的差异有显著性意义（P<0.05）；4Gy组与6Gy组的差异无显著性意义（P<0.05）。提示,2Gy组的差异可能更为显著。
　　
　　 结论：不同剂量放疗联合25μmol/LEGCG具有下调不同剂量放射治疗HepG2中hTERT基因表达水平的作用。同时，不同剂量放疗联合25μmol/LEGCG提高不同剂量放射治疗后HepG2细胞凋亡率。从而，EGCG有可能具有放疗增敏的作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

1绪言

2 理论分析

3 第一部分 EGCG对HepG2细胞凋亡和hTERT基因表达的影响

4第二部分 EGCG对HepG2细胞体外放疗的影响

5 结果分析和讨论

致谢

参考文献

附录1 文献综述:表没食子儿茶素没食子酸酯EGCG的抗肿瘤机制及放射增敏作用的研究进展

附录 2EGCG联合不同剂量放疗对人肝癌细胞系HepG2中hTERT表达的影响

附录3 （攻读学位期间发表论文目录）