EGCG对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

摘要

目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及可能的分子机制。
　　 方法：分别以终浓度为20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L、120mg/L、150mg/L的EGCG对HepG2细胞进行干预后，Cell Counting Kit-8(CCK-8)法在作用24h和48h时检测EGCG对肝癌HepG2细胞增殖的影响，并在倒置显微镜下观察细胞生长状态的变化;荧光显微镜及流式细胞术(FCM) Annexin V-FITC/PI双染法检测EGCG对HepG2细胞的凋亡诱导作用;Transwell侵袭实验检测EGCG对HepG2细胞侵袭力的影响;ELISA法检测HepG2细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。
　　 结果：EGCG各浓度组干预HepG2细胞24h、48h后，细胞的生长增殖均明显受到抑制，且随药物浓度和作用时间的增加加重，其24h IC25值和IC50值分别为58.19mg/L和133.90 mg/L。采用60mg/L和135 mg/L EGCG干预24h后，HepG2肝癌细胞凋亡率分别为32.03％和54.17％，明显高于对照组0.93％(p＜0.05);随着药物浓度的增加，细胞凋亡程度逐渐加重。Transwell侵袭实验显示，60mg/L和135 mg/LEGCG组细胞穿膜数分别为28.33个和0个，与对照组92.5个相比明显减少(p＜0.05)，对HepG2细胞侵袭力抑制率分别为69.47％和100％。ELISA检测结果显示，EGCG干预后HepG2细胞上清液中MMP-2和VEGF表达水平下降(p＜0.05)。
　　 结论：EGCG对HepG2细胞具有抑制增殖和侵袭作用，其机制可能与EGCG诱导HepG2细胞凋亡和抑制肿瘤细胞中MMP-2及VEGF表达水平，进而抑制细胞外基质降解和新生血管形成有关。

目录

摘要

引言

第1章 材料与方法

1．1 细胞株

1．2 主要试剂

1．3 实验仪器

1．4 主要试剂的配制

1．5 细胞培养方法

1．6 CCK-8实验检测EGCG对HepG2细胞增殖的影响

1．7 荧光显微镜AnnexinV-FITC／PI双染实验检测细胞凋亡情况

1．8 流式细胞术测细胞凋亡情况

1．9 Transwe11侵袭实验检测EGCG对HepG2细胞侵袭力的影响

1．10 ELISA实验检测EGCG对HepG2细胞中MMP-2和VEGF表达的影响

1．11 统计分析

第2章 结果

2．1 EGCG对HepG2细胞增殖和生长的影响

2．2 荧光显微镜观察EGCG作用后HepG2细胞的凋亡情况

2．3 FCM检测EGCG对HepG2细胞凋亡的影响

2．4 EGCG对HepG2细胞侵袭力的影响

2．5 EGCG对肝癌细胞HepG2中MMp-2和VEGF表达的影响

第3章 讨论

结论

参考文献

综述

攻读学位期间的研究成果

缩略词对照表

致谢

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