siRNA抑制EGFR对乳腺癌细胞放射敏感性的影响

摘要

目的: 采用干扰 RNA技术(small interfering RNA，siRNA)抑制SKBR-3，HER-2(+++)，EGFR(+++)乳腺癌细胞EGFR的表达，研究 EGFR对HER-2过表达细胞对X线敏感性的变化。
　　 方法: 质粒转染及鉴定：将细胞随机分为实验组、阴性对照组和空白组，重组质粒 EGFR-siRNA和 Neg-siRNA分别被转染入实验组及阴性对照组;Western blot检测各组细胞EGFR的表达水平；检测放疗后放射生物学指标：6MV射线照射4Gy后0，24h，48h收集细胞，流式细胞术检测细胞凋亡率；克隆形成实验检测细胞D0,SF2和α等值。
　　 结果: 质粒转染SKBR-3细胞，Western分析表明转染EGFR-siRNA的阳性细胞株在蛋白质水平受到明显抑制；X线照射24h及48h后，EGFR表达受抑制细胞凋亡率均高于转染阴性质粒组和空白对照组(P分别为0.045及0.039)；EGFR受抑制的细胞D0值和SF2值分别为 1.218和 0.376，低于转染阴性质粒细胞(1.599和0.584)和空白对照细胞(1.731和0.590)，α值为 0.335，高于转染阴性质粒细胞(0.167)和空白对照细胞(0.217)。
　　 结论: 运用RNAi技术可以有效抑制EGFR的表达从而提高SKBR-3细胞对X线的放射敏感性，EGFR是一个较理想的肿瘤分子治疗靶点。