CaMKⅡ/PKA途径在慢性心衰模型触发性心律失常产生中的作用

摘要

背景：钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和蛋白激酶A（PKA）作为β肾上腺素受体下游信号转导途径，能磷酸化心肌细胞内多种钙调节蛋白，在心肌细胞内钙稳态调控中起着非常重要的作用。近年来在转基因动物和正常动物上的研究发现，与PKA途径相比较，CaMKⅡ信号途径可能是β肾上腺素诱导的舒张期钙离子渗漏所导致的触发活动中的主要信号途径。但PKA和CaMKⅡ在兰尼丁受体（RyR2）功能紊乱所致的舒张期钙离子渗漏的作用仍然存在很大争议，其所导致的直接电生理特性仍然不清楚。
　　 目的：研究异丙肾上腺素和高频率刺激对心衰心肌细胞DADs产生的影响以及CaMKⅡ的特异抑制剂KN93和PKA特异抑制剂H89在DADs产生中的作用。
　　 方法：制备家兔慢性心衰模型，心脏超声测定LVEF<44％，酶解法分离单个心室肌细胞，应用全细胞膜片钳技术记录单细胞动作电位（AP），用含1μmol/L 异丙肾上腺素的正钙台氏液灌流心室肌细胞，在1-3Hz电刺激下，观察心肌细胞50％动作电位时程(APD50％)和90％动作电位时程(APD90％)，并诱发DADs。在此基础上分别用KN93（1μmol/L）和H89（1μmol/L）进行灌流，观察KN93和H89对DADs发生率、DADs的幅值、联律间期和发生个数的影响。
　　 结果：
　　 1.CHF组心肌细胞的APD90和APD50较Ctl组延长（P<0.05），CHF+ISO组的APD90和APD50较CHF组缩短（P<0.05）。
　　 2.给予细胞1Hz刺激，Ctl组、Ctl+ISO组、CHF组、CHF+ISO组的DADs发生率分别为15％(3/20)、45％(9/20)、26.7％(12/45)、92.3％(36/39)。Ctl+ISO组DADs发生率较Ctl组明显增加(P<0.05)，CHF+ISO组的DADs发生率较CHF组明显增加(P<0.05)，CHF组DADs发生率较Ctl组无明显差别(P>0.05)，CHF+ISO组的DADs发生率较Ctl+ISO组明显增加(P<0.05)。
　　 3.给予CHF组心肌细胞1-3Hz刺激，心肌细胞DADs的发生率分别为26.7％(12/45)、76.2％(32/42)、83.9％(26/31)。2Hz组与1Hz组比较DADs发生率明显增高(P<0.05)；2Hz组与3Hz组比较DADs发生率无明显差别(P>0.05)。
　　 4.在灌流1μmol/L异丙肾上腺素的台氏液，采用1Hz电刺激诱发DADs的基础上，记录KN93组的DADs诱发率为50％(7/14)，KN93对DADs的抑制率为50％，KN93组DADs发生率较加药前明显降低(P<0.05)；再给予2Hz的刺激，记录DADs的幅度、联律间期和个数，可观察到KN93可明显降低DADs幅度(5.83 1.90 Vs 1.82 0.78,P<0.05)，延长联律间期(250.44 108.36 Vs 524.62 390.91,P<0.05)和减少DADs的诱发个数(4.95 0.95 Vs 2.42 0.90,P<0.05)。
　　 5.在灌流1μmol/L异丙肾上腺素的台氏液，采用1Hz电刺激诱发DADs的基础上，记录H89组的DADs诱发率为15.4％(2/13)，H89对DADs的抑制率为84.6％，H89组DADs发生率较加药前明显降低(P<0.05)；再给予2Hz的刺激，记录DADs的幅度、联律间期和个数，可观察到KN93可明显降低DADs幅度(5.83 1.90 Vs 1.65 0.77,P<0.05)，延长联律间期(250.44 108.36 Vs 837.48 313.53,P<0.05)和减少DADs的诱发个数(4.95 0.95 Vs 1.83 0.94,P<0.05)。
　　 6.在灌流1μmol/L异丙肾上腺素的台氏液，采用1Hz电刺激诱发DADs的基础上，记录KN93和H89对DADs的抑制率分别为50％和84.6％，经检验KN93组和H89组比较二者对DADs的抑制率无明显差别(P>0.05)。
　　 结论：慢性心衰心肌细胞APD延长，但其DADs发生率并未明显增加，而在给予异丙肾上腺素和高频率刺激时，其DADs发生率明显增高。KN93和H89均能有效抑制心衰心肌细胞DADs的发生，但二者对DADs的抑制作用没有统计学差异。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

1. 材料与方法

2. 结 果

3. 讨 论

4. 总结与展望

5. 参考文献

综 述 心衰与触发性心律失常

致 谢