同步双脉冲胃电刺激对不同病程糖尿病大鼠的胃动力作用及其机制研究

摘要

目的:了解同步双脉冲胃电刺激(SGES)对不同病程糖尿病大鼠胃动力的影响,并观察各组大鼠胃组织肠神经胶质细胞(EGC)的变化,以探讨SGES对胃动力影响的可能机制。
　　方法:SD雄性大鼠46只,随机分成对照组、糖尿病组和糖尿病胃电刺激组,糖尿病组分成早期糖尿病组(成模后1-2周)和晚期糖尿病组(成模后8-9周),对照组和胃电刺激组的相应时点与糖尿病组相一致。胃电刺激组又分成急性胃电刺激组(ASGES,60min)和慢性胃电刺激组(CSGES,持续刺激1周,60min/次/天)。所有大鼠均在胃浆膜层植入两对电极,在给药前和造模成功后各记录一次胃慢波,并观察刺激后的胃慢波变化,应用酚红灌胃法检测胃排空,同时透射电镜下观察胃肌间神经丛EGC超微结构变化,免疫组化法及RT-PCR检测胃组织中活化EGC特异性蛋白S100B的表达状态。
　　结果:1.与早期对照组大鼠相比,早期糖尿病大鼠胃慢波频率加快,胃排空率加快(P<0.05),晚期糖尿病大鼠出现胃慢波节律紊乱,胃排空率明显减慢(P<0.05);2.晚期对照组大鼠胃排空率稍低于早期对照组,胃慢波节律基本正常,胃排空率之间差异无统计学意义(P=0.073);3.晚期对照组大鼠胃窦组织内活化EGC特异性蛋白S100B表达低于早期对照组,差异有统计学意义(P<0.01);4.早期对照组和早期糖尿病大鼠S100B蛋白表达差异无显著性(P>0.05),胃窦组织EGC超微结构基本正常;5.晚期糖尿病大鼠胃窦组织S100B蛋白表达较晚期对照组显著减少(P<0.01),EGC超微结构可见线粒体出现空泡变性,内质网扩张,中间丝明显减少,晚期对照组大鼠可见线粒体轻度空泡变性,中间丝减少;6.急、慢性胃电刺激可以恢复早、晚期糖尿病大鼠正常胃慢波节律,并改善晚期糖尿病大鼠胃排空延迟状况,S100B蛋白表达增加,EGC超微结构可见线粒体数量和中间丝增加,慢性胃电刺激的效应优于急性胃电刺激。
　　结论:鼠龄增加所致胃排空障碍可能与EGC的活性有关;适当参数的SGES能增加晚期糖尿病大鼠胃排空,改善胃慢波节律紊乱,这一效应可能与ENS中EGC活化有关。

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英文缩略词

前言

材料和方法

1. 实验材料

1.1 实验动物

1.2 主要仪器

1.3 主要试剂

2. 实验方法

2.1 动物模型制备

2.2 实验分组

2.3 记录固有胃慢波

2.4 同步双脉冲胃电刺激

2.5 大鼠胃排空率检测

2.6 电镜检测EGC超微结构

2.7免疫组化检测EGC特异性蛋白S100B的表达

2.8 RT-PCR检测EGC特异性蛋白S100B的mRNA表达：

3. 统计分析

结果

1.大鼠成模情况

2. 大鼠胃慢波测定

3.大鼠胃排空率测定

4. 电镜观察EGC超微结构

5. 各组大鼠EGC中S100B蛋白的表达

5.1 免疫组织化学

5.2 RT-PCR

讨论

参考文献

综述

致谢