缝隙连接抑制剂甘珀酸在脑缺血再灌注后对血脑屏障连接复合体的影响

摘要

目的:探讨脑缺血再灌注后,缝隙连接阻断剂甘珀酸对血脑屏障通透性、脑组织水肿以及血脑屏障连接复合体相关蛋白表达量的影响。
　　方法:用健康的清洁级SD大鼠制作大脑中动脉栓塞再灌注模型,实验组大鼠侧脑室注射缝隙连接特异性阻断剂甘珀酸(Carbenoxolone,CBX),实验对照组侧脑室注射等量生理盐水,空白对照组不做特殊处理。然后分别进行下列研究:(1)伊文氏蓝(EvansBlue,EB)法测定血脑屏障(Blood-BrainBarrier,BBB)通透性的改变;(2)头颅影像学法量化判断脑组织水肿程度;(3)免疫荧光染色法检测不同时间点(0h、6h、1d、3d、7d)血脑屏障连接复合体相关蛋白(VE-cadherin、ZO-1、Claudin5)的表达。
　　结果:与对照组相比,CBX干预组每克脑组织的EB含量为(317.60±1.31)ng,对照组每克脑组织的EB含量为(975.29±1.23)ng,干预组每克脑组织的EB含量明显低于对照组,P<0.05,统计结果有显著差异。干预组梗死中心区ADC值为(6.14±0.39)×10-4mm2/s,对侧相应区域的ADC值为(6.93±0.29)×10-4mm2/s,对照组梗死中心区的ADC值为(5.91±0.86)×10-4mm2/s,对侧相应区域的ADC值为(7.79±0.37)×10-4mm2/s;CBX干预组的rADC值的范围为70.6％-96.3%,对照组的rADC的范围为62.6%-87.0%,干预组梗死中心区的ADC值与rADC值均高于对照组(P<0.05)。干预组ZO-1、Claudin-5、VE-cadherin标记的阳性血管数量、面积及积分光密度值均较对照组高(P<0.05)。
　　结论:用CBX干预后大鼠血脑屏障的通透性损伤减轻,脑水肿的程度减轻,推断缝隙连接特异性阻断剂CBX在脑缺血再灌注损伤后对血脑屏障有保护作用。CBX干预组的血脑屏障连接复合体相关蛋白的表达量高于对照组,提示CBX对血脑屏障的保护作用除作用于缝隙连接外,可能对紧密连接和粘附连接亦有一定的影响。

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本文重要英文缩略词及单位（ABBREVIATION）

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前言

材料与方法

一、 实验用动物

二、试剂：

三、仪器材料

四、关键试剂的配制

五、实验动物模型的制作方法

实验结果

1、CBX对脑组织内EB渗出量的影响

2、磁共振扫描及ADC值、rADC值的测量

3、脑组织形态学的观察

4、免疫荧光染色结果

讨论

参考文献

第二部分 论文综述血脑屏障连接复合体在缺血再灌注脑损伤过程中的调节作用的研究现状

参考文献

致谢