TCRζ链及其相关蛋白ZAP70在皮肌炎患者中的表达

摘要

目的:分析TCRζ链及其相关蛋白ZAP70在皮肌炎患者外周血单个核细胞中的表达情况,探索TCR/CD3复合物信号传导分子在皮肌炎发病机制中作用。
　　方法:收集同济医院风湿科2011年10月至2012年8月期间住院及门诊的皮肌炎(dermatomyositis,DM)患者资料及新鲜外周血。通过实时定量RT-PCR技术,采用相对定量法,以β-actin为内参基因,检测外周血单个核细胞中TCRζ链和ZAP70mRNA表达。统计学分析运用SPSS(statisticalprogramforSocialScience)17.0软件进行。Rea-timePCR结果采用2-△CT法进行分析。数据以均数±标准差表示,均值的比较采用t检验进行分析,P<0.05为差异具有统计学意义。
　　结果:皮肌炎患者外周血单个核细胞中TCRζ链及ZAP70的mRNA的表达量均显著低于健康对照组,P<0.05具有统计学意义。ζ链和ZAP70mRNA表达在DM不同年龄组、性别组均无明显差别,P>0.05。伴有关节炎的DM组、伴有肌力降低的DM组和伴有间质性肺炎DM组分别与无关节炎DM组、肌力正常DM组、无间质性肺炎DM组相比,其ζ链和ZAP70的mRNA的表达量均无明显差别,P均>0.05。伴雷诺现象的DM组与无雷诺现象的DM组相比,ζ链mRNA表达降低,P<0.05,ZAP70mRNA表达两组之间无明显差别。在实验室检查中,肌酶(如AST、CK和LDH)升高组、炎症指标升高组(ESR,CRP)、及抗Jo-1抗体阳性的组,分别与其对应组相比,ζ链和ZAP70的mRNA均无明显差别。
　　结论:TCRζ链及其相关蛋白ZAP70在皮肌炎患者中低表达,TCRζ链与雷诺现象具有一定关联。提示TCRζ链及其相关蛋白ZAP70的低表达可能是DM患者T细胞免疫功能异常原因之一。

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前言

材料

1.1 主要仪器和设备

1.2主要试剂和耗材

1.3试剂配制

资料与方法

2.1临床资料采集

2.2外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMCs）的采集

2.3 用Trizol法提取PBMCs中的总RNA

2.4、引物

2.5逆转录反应

2.6荧光定量PCR反应

2.7数据处理

结果

讨论

参考文献

综述

参考文献

致谢