槲皮素对剧烈运动小鼠心肌、肝脏损伤的保护作用及其机制研究

摘要

目的：探讨槲皮素对剧烈运动小鼠心肌、肝脏氧化损伤的保护作用；探讨槲皮素对剧烈运动小鼠心肌线粒体氧化应激和功能紊乱的拮抗作用；探讨槲皮素对剧烈运动小鼠肝脏炎性反应的干预效应及对NF-κB/IκBα介导炎症的调节作用。
　　方法：48只成年雄性BALB/c小鼠，随机分为正常对照组、运动对照组、运动+槲皮素20mg/(kg·d)组、运动+槲皮素50mg/(kg·d)组、运动+槲皮素100mg/(kg·d)组和槲皮素100mg/(kg·d)组。根据Marra法并进行适当修改建立急性剧烈运动损伤动物模型。槲皮素干预四周，在干预期后10天，运动组先进行2天适应性训练，休息2天后，开始正式运动。初始速度为10m/min，在10min内逐渐增加负荷至28 m/min，坡度为5度，持续90min，采用以上运动方式连续运动7天，末次运动完成后即刻处死小鼠。
　　结果：
　　1、与正常对照组相比，高剂量槲皮素干预明显降低剧烈运动导致的小鼠血清CK-MB（P<0.01）、AST（P<0.01）和ALT（P<0.01）水平上升；槲皮素干预明显抑制剧烈运动导致的小鼠心肌和肝脏的氧化应激以及超微病理结构异常。
　　2、槲皮素干预明显拮抗了剧烈运动导致的小鼠心肌线粒体氧化应激以及心肌线粒体膜电位（P<0.01）和呼吸控制率（RCR）（P<0.05）的下降。
　　3、剧烈运动导致小鼠血清TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）和IL-10（P<0.05）水平显著升高，槲皮素干预明显降低剧烈运动小鼠血清TNF-α（P<0.05）、IL-1β（P<0.05）和IL-6（P<0.05）水平。
　　4、与正常对照组相比，剧烈运动小鼠肝脏IL-1β（P<0.01）、IL-6（P<0.01）和IL-10（P<0.01）mRNA水平显著升高，槲皮素干预降低了运动小鼠肝脏IL-1β（P<0.05）和IL-6（P<0.01）mRNA水平。
　　5、与正常对照组相比，剧烈运动导致小鼠肝脏iNOS（P<0.01）、COX-2（P<0.01）和ICAM-1（P<0.01）mRNA表达分别增加3.2倍、1.6倍和0.7倍，槲皮素干预明显抑制了运动小鼠肝脏iNOS（P<0.01）、COX-2（P<0.05）和ICAM-1（P<0.05）mRNA水平升高。槲皮素干预抑制了剧烈运动导致的小鼠肝脏iNOS、COX-2和ICAM-1蛋白表达增加。
　　6、采用免疫荧光双标技术，运用激光共聚焦显微镜观察到槲皮素干预明显抑制剧烈运动导致的小鼠肝细胞NF-κB转位入核。
　　7、与正常对照组相比，剧烈运动导致肝脏IκBα蛋白表达降低0.59倍（P<0.05），P-IκBα蛋白表达增加1.7倍（P<0.01）；槲皮素干预提高IκBα蛋白表达（P<0.05），同时抑制P-IκBα蛋白表达（P<0.05），表明槲皮素对剧烈运动导致的IκBα磷酸化有一定抑制作用。剧烈运动小鼠肝脏P-IKKα表达比正常对照组增加9.9倍（P<0.01），槲皮素明显抑制P-IKKα的高表达（P<0.01）。
　　8、剧烈运动小鼠肝细胞核内NF-κB与DNA结合能力提高115％（P<0.01），槲皮素干预明显抑制运动小鼠肝细胞核内NF-κB与DNA的结合活性（P<0.01）。
　　结论：槲皮素对剧烈运动导致的小鼠心肌和肝脏氧化损伤具有明显保护作用；槲皮素对剧烈运动小鼠心肌线粒体超微结构损伤和功能紊乱的拮抗作用，可能与其抗氧化作用有关；槲皮素可能通过调节P-IKKα/IκBα/P-IκBα信号通路而抑制NF-κB转录激活，发挥良好的抗炎保护作用，减轻了剧烈运动导致的肝脏损伤。

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第一部分 槲皮素对剧烈运动小鼠心肌、肝脏氧化损伤的保护作用

1. 材料与方法

2. 结果

3. 讨论

第二部分 槲皮素对剧烈运动小鼠心肌线粒体氧化应激和功能紊乱的拮抗作用

1材料和方法

2 结果

3 讨论

第三部分 槲皮素对剧烈运动小鼠肝脏炎性损伤的保护效应：NF-κB/IκBα的作用

1. 材料与方法

2. 结果

3 讨论

小结

参考文献

综述

附录 博士期间工作小结

缩略词表

致谢