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Trop2在骨密质来源干细胞修复心肌缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

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第一部分 小鼠骨密质来源干细胞的分离、培养及鉴定

前言

材料与方法

1.材料

2.动物

3.CBSCs的分离、培养

4.CBSCs的鉴定

5.CBSCs的诱导成骨分化

6.CBSCs的诱导成脂分化

结果

1.CBSCs的分离及培养

2.CBSCs的表型鉴定

3.CBSCs的诱导成骨和成脂分化

讨论

第二部分 Trop2在CBSCs中表达水平的变化对其抗缺血再灌注损伤效应的影响

前言

材料与方法

1.材料

2.小鼠心肌缺血再灌注损伤模型的建立

3. CBSCs心肌内注射

4.小鼠心肌电镜标本及线粒体功能检测标本取材

5.蛋白质免疫印迹(western blotting)试验

5.免疫荧光染色

6.实时荧光定量PCR

7.心脏组织的脱水、石蜡包埋及切片

8.苦味酸-天狼猩红染色(PSR染色)及小鼠左室心肌纤维化检测

9.经胸超声心动图

结果

1.Trop2基因敲除小鼠的构建

2.Trop2缺乏降低了CBSCs在受损伤区域的定植

3.Trop2缺乏降低了CBSCs对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

4.Trop2促进VEGF和FGF-2的产生以加速血管生成

讨论

第三部分 Trop2在CBSCs心肌保护中发挥作用的机制研究

前言

材料与方法

1.材料

2.原代新生小鼠心肌细胞分离

3.建立过氧化氢刺激诱导小鼠原代心肌细胞损伤的模型

4.心肌细胞线粒体提取

5. 质粒构建

6. 蛋白质免疫共沉淀

7.TUNEL检测

结果

1.体外研究表明Trop2的缺失减弱了CBSCs抗心肌损伤的能力

2.Trop2缺失抑制了CBSCs细胞Akt及GSK3β的磷酸化

3.Trop2缺失削弱了CBSCs自身的抗损伤能力

讨论

小结

综述:干细胞治疗心脏损伤的研究进展

参考文献

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