声明
1绪论
1.1 phf6基因
1.1.1 phf6的结构及其表达
1.1.2 phf6的功能研究
1.1.3 phf6与疾病
1.2 斑马鱼及其造血过程
1.2.1斑马鱼
1.2.2斑马鱼造血系统的发育及其关键调控因子
1.3 研究目的和意义
2实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验仪器
2.1.2实验试剂
2.1.3 常用载体及菌株
2.2 实验方法
2.2.1 显微注射技术
2.2.2 morpholino敲低
2.2.3 CRISPR/Cas9敲除
2.2.4 RNA的提取与纯化
2.2.5 DNA的提取与纯化
2.2.6 RNA探针的制备
2.2.7 原位杂交
2.2.8中性红染色
2.2.9 O-Dianisidine染色
2.2.10 实时荧光定量PCR
3结果与分析
3.1 phf6基因的时空表达
3.2 phf6 morpholino敲低对造血的影响
3.2.1 phf6 splicing morpholino的有效性验证
3.2.2 phf6 morpholino敲低后原始造血的发育
3.2.3 phf6 morpholino敲低后造血干细胞的发育
3.2.4 phf6 morpholino敲低后红系细胞的发育
3.2.5 phf6 morpholino敲低后髓系细胞的发育
3.2.6 phf6 morpholino敲低后淋系细胞的发育
3.3 利用CRISPR/Cas9敲除phf6
4 总结与讨论
致谢
参考文献
