低氧诱导外泌体通过HIF--1α和miR--650环路促进胰腺癌细胞侵袭与转移

目录

声明

前言

全文缩略词表

材料与方法

1.材料

1.1细胞系

1.2 引物

1.3 主要试剂

1.4主要仪器和设备

2. 试验方法

2.1 细胞培养基外泌体的提取

2.2 外泌体电镜

2.3 细胞培养及处理

2.4细胞以及外泌体总RNA的提取

2.5 RNA逆转录

2.6 qRT-PCR（实时荧光定量PCR）

2.7细胞中以及外泌体总蛋白的提取

2.8Western blot（蛋白质印迹法）

2.9细胞迁移实验

2.10 细胞转染

2.11 transwell实验（细胞侵袭实验）

2.12 CHIP

2.13荧光素酶报告基因

2.14 HIF-1α蛋白稳定性检测

2.15 双荧光素酶实验

3．统计方法

实验结果

一、低氧胰腺癌细胞外泌体促进常氧胰腺癌细胞侵袭和转移

外泌体的提取和鉴定

低氧胰腺癌细胞外泌体促进常氧细胞侵袭和转移

二、外泌体miRNAs的检测以及其异常表达机制

外泌体miRNAs差异性表达分析

miR650高表达机制

三、miR-650在低氧外泌体促侵袭、转移中发挥重要作用

miR-650可以促进胰腺癌细胞侵袭和转移

抑制miR-650减弱低氧胰腺癌细胞外泌体的促癌能力

四、外泌体miR-650向常氧细胞传递低氧信号

外泌体miR-650传递低氧信号

miR-650的下游靶标是VHL

miR-650通过抑制pVHL表达而促进HIF-1α稳定性

讨论

参考文献

综述:外泌体与胰腺癌关系以及研究进展

参考文献

致谢

附录 硕士期间参与论文发表情况