声明
第一部分 Nrf2调控衰老进程中EPCs功能及衰老
1 引言
2 材料和方法
2.1 实验动物及分组
2.2 EPCs的提取和培养
2.3 衰老相关的β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）实验
2.4小鼠单侧下肢缺血模型手术和术前术后血流分析
2.5腓肠肌毛细血管密度检测
2.6 EdU细胞增殖实验
2.7 Matrigel基质胶成管实验
2.8 NO和VEGF分泌量的检测
2.9 细胞免疫荧光实验
2.10免疫印迹western blot分析
2.11 Real-time PCR 检测
2.12 细胞内活性氧ROS测量
2.13 超氧化物歧化酶(SOD)测定
2.14 丙二醛(MDA)测定
2.15 siRNA转染
2.16 统计学分析
3.1 EPCs存活，迁移，增殖，分泌，血管生成的能力随年龄增加而下降
3.2 EPCs年龄相关性生物学功能的受损与EPCs中Nrf2表达降低相关
3.3 衰老会损害小鼠下肢缺血模型的新生血管生成
3.4 调节Nrf2表达显着影响EPCs的存活和生物学功能
3.5 Nrf2表达变化调节衰老过程中EPCs的氧化应激水平
3.6 Nrf2调节NLRP3/NF-κB途径
4 讨论
第二部分 Nrf2调控糖尿病EPCs的功能及衰老
1 引言
2 材料和方法
2.1 动物和糖尿病模型
2.2 EPCs的分离及培养
2.3 内皮祖细胞的鉴定
2.4 检测EPCs迁移能力的transwell实验和划痕实验
2.5 EdU细胞增殖实验
2.6 成管能力分析
2.7 一氧化氮(NO) 、血管内皮生长因子(VEGF)及基质源性生长因子(SDF-1α)分泌的测定
2.8 测量细胞内活性氧(ROS)水平
2.9 超氧化物歧化酶(SOD)测定
2.10 丙二醛(MDA)测定
2.11 siRNA转染
2.12Western blot分析
2.13实时定量PCR (RT-qPCR)
2.14 衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色
2.15 统计学分析
3 结果
3.1 来源于DM小鼠的早期EPCs的特点
3.2 DM小鼠来源的EPCs的迁移、增殖、分泌和成管功能受损
3.3 来源于糖尿病小鼠EPCs的Nrf2表达降低，氧化应激水平升高
3.4 Nrf2沉默损害EPCs的迁移、增殖、分泌和血管生成功能
3.5 Nrf2沉默使EPCs中胞内ROS、MDA水平升高，SOD活性降低
3.6 TBHQ活化糖尿病小鼠体内EPCs中Nrf2的表达可促进EPCs的迁移、增殖、成管和分泌功能的增强
3.7 tBHQ激活Nrf2可以减轻DM小鼠来源的EPCs中氧化应激产物的生成
3.8 Nrf2调控DM小鼠EPCs衰老
4 讨论
结论
参考文献
综述:Nrf2在衰老中的研究进展
致谢
附录1：攻读学位期间论文发表目录
附录2：英文缩略词表
