声明
主要中英文缩略词表
前言
第一部分 IL-33/ST2在系统性硬化患者体内的表达水平及其临床意义
引言
实验材料
一、主要仪器和器械
二、主要试剂与材料
实验方法
一、血浆及皮肤标本获取
二、酶联免疫吸附方法（ELISA）法检测血浆中IL33/ST2水平
三、免疫组织化学法检测皮肤组织IL33/ST2表达
四、免疫组织荧光法检测皮肤组织IL33/ST2定位
五、统计学分析
实验结果
一、入组SSc患者及健康对照的疾病活动度及临床特征
二、SSc患者与健康对照血浆IL-33, sST2水平检测
三、SSc患者病变皮肤IL-33及ST2免疫组化染色
四、SSc患者皮肤ST2免疫荧光染色
实验讨论
第二部分 IL-33对于人成纤维细胞功能的影响
引言
实验材料
一、主要仪器和器械
二、主要试剂与材料
实验方法
一、人皮肤原代成纤维细胞的提取与培养
二、细胞免疫荧光检测成纤维细胞IL33/ST2表达
三、流式细胞仪检测成纤维细胞纯度
四、细胞增殖检测
五、细胞划痕实验
六、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR法）
七、可溶性胶原含量检测
八、流式微球检测法（CBA法）检测培养上清细胞因子
九、ELISA法检测上清单核细胞趋化因子-1（MCP-1）水平
十、 统计学分析
实验结果
一、皮肤原代成纤维细胞的鉴定及纯度分析
二、皮肤原代成纤维细胞表达IL33及其受体ST2
三、IL-33促进成纤维细胞增殖
四、IL-33促进成纤维细胞迁移
五、IL-33诱导成纤维细胞产生胶原
六、IL-33对于成纤维细胞释放炎症相关因子无明显促进作用
实验讨论
第三部分 IL-33/ST2在系统性硬化小鼠模型中的表达及作用
引言
实验材料
一、主要仪器和器械
二、主要试剂与材料
三、实验动物
实验方法
一、BLM诱导小鼠皮肤纤维化模型的构建
二、小鼠皮肤IL-33/ST2免疫组织化学染色
三、皮肤组织匀浆液中IL-33 ELISA法检测
四、皮肤羟脯胺酸含量检测
五、小鼠皮肤组织HE染色
六、小鼠皮肤组织Masson特殊染色
七、流式细胞术检测
八、统计学分析
实验结果
一、BLM诱导小鼠皮肤纤维化模型的鉴定
二、IL-33/ST2在BLM诱导小鼠纤维化皮肤中的表达
三、IL-33缺失后BLM诱导小鼠皮肤纤维化减轻
四、IL-33缺失后皮肤局部BLM诱导浸润的ST2+细胞减少
五、IL-33缺失对BLM诱导小鼠皮肤纤维化模型外周T/B细胞比例无影响
六、IL-33缺失不影响BLM诱导皮肤局部肥大细胞浸润
实验讨论
结论
参考文献
综述:纤维化—系统性硬化症的杀手
攻读学位期间的科研情况
致谢
