地蜂子体外抗HSV-1病毒活性及其作用机理的初步研究

摘要

病毒性感染是目前严重危害人类生命健康的重大疾病。有数据显示，近60％的传染疾病是由病毒感染所引起的。截止到目前，全世界被人类发现的病毒已经超过3000种，并且不断有新的病毒品种或者变异品种被发现。然而，用于病毒性疾病治疗的药物，由于病毒的耐药性以及药物自身明显的毒副作用，临床使用很不理想。因此，不断寻找高效低毒的抗病毒天然药物显得尤为重要。
　　地蜂子来源蔷薇科委陵菜属植物三叶委陵菜Potentilla freyniana Bornm.及其变种中华三叶委陵菜P. freynianaBornm.var. sinicaMigo的干燥根茎。具有清热解毒、活血散瘀、消肿止痛的功效。现代研究表明，地蜂子具有抗病毒、抗炎镇痛以及免疫调节等作用，其独特的抗带状疱疹病毒作用尤为突出，颇具开发价值。
　　本论文在课题组前期研究的基础上，将地蜂子总提物用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯部位浸膏；将该浸膏溶于水中，滤过，滤液上样于D101大孔吸附树脂柱，然后用不同浓度乙醇洗脱得到20%、40%、60%及95%乙醇流分段，各流分段回收乙醇，残渣挥干溶剂备用；同时采用明胶去鞣质的方法，分别处理地蜂子乙醇提取物、各流分段，得到总提物去鞣质部位、乙酸乙酯去鞣质部位以及地蜂子总提物鞣质部位。通过 MTT法测定各组分对细胞的毒性作用，确定各组分的安全剂量；运用CPE观察和MTT法测定地蜂子各组分对HSV-1的综合抑制作用；以治疗指数TI为综合评价指标，进行各组分抗HSV-1病毒筛选。结果表明，地蜂子总提物具有明显抗 HSV-1病毒的作用，其治疗指数（TI）为15.13，具有很好的抗HSV-1病毒活性，且具有高效低毒的特点；总鞣质部位TI为6.02，说明具有明显抗HSV-1病毒的作用，且具有较好的安全性；乙酸乙酯部位20%乙醇组分及40%乙醇组分的抗HSV-1病毒活性较好，其TI分别为5.54、5.84；乙酸乙酯部位具有一定的抗病毒活性，其TI为2.54；其余地蜂子各组分抗HSV-1活性均不明显。
　　通过设置直接杀灭病毒组、抗病毒吸附组和抗病毒生物合成组，对地蜂子提取物抗 HSV-1病毒作用机理进行了初步探索性研究，结果显示地蜂子提取物具有很强的直接杀灭病毒的作用，说明地蜂子提取物中含有破坏病毒结构的成分；对 HSV-1病毒的抗吸附作用均强于抗 HSV-1病毒生物合成作用，说明抗病毒作用可能发生在病毒作用的早期阶段。

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缩略语释义

前言

第一章 文献综述

1.中药（天然药物）抗HSV-1研究

1.1 单味药抗HSV-1

1.2 中药复方抗HSV-1病毒的研究进展

2. 地蜂子研究进展

2.1 地蜂子的生药学研究

2.2 化学成分研究

2.3 药理作用研究

2.4 民间应用研究

2.5 小结与展望

3. 本论文研究的内容及意义

第二章 地蜂子提取物体外抗HSV-1药效学实验

1. 实验材料和方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2 实验结果

2.1 病毒毒力测定结果

2.2 地蜂子各提取物对Hep-2细胞的毒性测试结果

2.3 地蜂子提取物体外抗HSV-1的药效学实验结果

3. 讨论

第三章 地蜂子提取物抗HSV-1病毒作用机理的初步研究

1 实验材料和方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2 实验结果

2.1 病毒PFU结果

2.2 地蜂子提取物不同给药方式对HSV-1病毒空斑减数率的影响

3.讨论

结语与创新

参考文献

已发表和待发表的论文

致谢