“接骨丹”对兔骨折愈合过程的促进作用效应试验研究

摘要

目的：
　　骨折是临床上多发疾病和常见疾病，主要包括骨小梁中断和皮质骨断裂，骨折不愈合或延迟愈合是骨折治疗中比较棘手的问题,骨折愈合过程是一个极其复杂的组织学、生物学、内分泌学、生物力学修复过程。骨折愈合影响因素众多，包括全身因素和局部因素、医源性因素、骨生长因子、微量元素、生物力学因素。据不完全统计，大概有5％-10%的骨折患者会因为各种原因发生不愈合、延迟愈合等不良后果。因此如何促进骨折愈合、缩短骨折愈合周期、恢复骨的正常功能和结构一直是医学界研究的焦点和热点。虽然说加快骨折愈合的方法有很多，但是有一些治疗办法的效果并不显著，祖国医学治疗骨折折历史悠久，历经了几千年的临床实践检验，其简单方便、安全有效、毒副作用低、成本低廉等特点一直被医生和患者所认可。本课题在祖国医学理论指导下，开展“接骨丹”对骨折愈合过程的促进作用效应研究，希望能对中医药促进骨折愈合提供进一步的试验依据。
　　方法：
　　新西兰大白兔20只，年龄10-12个月，体重2.5±0.25Kg，身长约25-30cm，四肢无畸形，活动自如，生命体征平稳，饮食正常，无传染病，动物喂养于标准动物房，适应性喂养1周开始实验。用显微外科骨刀在股骨颈中部凿断，形成股骨颈骨折，克氏针固定，术后8天拆线，以生命体征稳定、正常进食、无感染、内固定无明显移位、脱落为造模成功。随机分为2组，每组10只，A组为对照组，只做复位固定；B组为实验组，在复位固定基础上采用中药方剂“接骨丹”治疗。术后4、8、12w拍摄双髋关节正位X线片和进行核素骨显像检查，双髋关节正位取 X线片，以99mTc-亚甲基二磷酸（99mTc-MDP）为示踪剂，SPECT及配套系统骨同位素显像；双侧股骨头的血液灌注的情况以头干比的比值（股骨头和同侧股骨干的99mTc-MDP浓集值相比）比较；血液流变学检测全血黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积；全自动生化分析仪检测血钙和血磷、血清碱性磷酸酶；ELISA实验检测骨形态发生蛋白、转化生长因子β、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子；生物力学试验检测骨痂最大载荷、挠度和刚度，Westemblot法检测骨骼中胶原蛋白含量，运用图象分析系统进行检测，并对数据进行统计分析。
　　结果：
　　1.X线结果观察：术后4周股骨颈骨折线模糊不清楚，实验组骨痂逐步形成，对照组有骨膜反应，骨痂阴影密度实验组比对照组高；术后8周骨实验组骨折线基本消失，有外骨痂桥接骨折断端,面积逐渐缩小,髓腔未完全再通，对照组可见骨痂形成,髓腔未通，骨痂生长面积和骨痂阴影密度比较，实验组优于对照组；术后12周骨折基本愈合，实验组骨痂生长速度比较快,骨折线完全消失,髓腔完全再通；对照组可见到比较模糊的骨折线,有明显骨痂形成,面积缩小,髓腔未通。实验组骨折愈合质量评分第4周、8周、12周均明显优于对照组,有显著统计学意义（P＜0.01），结果认定实验组较对照组骨折愈合较快。
　　2.骨折部位灰度值比较：实验组与对照组比较，骨折部位灰度值4W、8W、12周实验组高于对照组，差异有显著性统计学意义（P＜0.01）。
　　3.骨同位素显像结果：实验组与对照组比较，股骨头处核素浓集明显，头干比值比较大，4W、8W差异有统计学意义（P＜0.05）,12W差异无统计学意义（P＞0.05）,4W、8W、12W头干比值随时间推移出现下降势。
　　4.血液流变学测定结果：实验组与对照组比较，全血黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积降低明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　5.接骨丹对生化指标影响：血清钙离子浓度4W、8W、12周实验组高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；血清磷离子浓度实验组与对照组血清磷离子浓度随时间推移逐渐上升，8周趋于稳定， 4W、8W、12周实验组高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；血清钙磷乘积比较4W、8W、12周钙磷乘积实验组高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；血清碱性磷酸酶活性4W、8W、12周血清碱性磷酸酶活性高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01）。
　　6.接骨丹对骨生长因子影响：4W、8W、12W实验组BMP2高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；4W、8W实验组IGF高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01），12W两组无显著性差异（P>0.05）；4W、8W实验组TGF-β1高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01），12W两组无显著性差异（P>0.05）；4W、8W实验组PDGF高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01），12W两组无显著性差异（P>0.05）；4W、8W实验组bFGF高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01），12W两组无显著性差异（P>0.05）。
　　7.接骨丹对生物力学影响：最大载荷、挠度、刚度12W实验组高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01）。
　　8.接骨丹对Ⅰ型胶原蛋白的影响：Ⅰ型胶原蛋白4W时实验组高于对照组，差异有显著统计学意义（P＜0.01），8W实验组与对照组Ⅰ型胶原蛋白表达较少，两组差异无统计学意义（P>0.05）,12W两组无表达。
　　结论：
　　1.接骨丹能明显改善骨折端微循环，增加局部血供，可以降低血液粘稠度,使局部血液循环尽早恢复,同时通过改善血液流变学的性质,使血液浓粘、凝集的程度减轻,加快血肿内瘀血的吸收,改善血液流变状态,增加局部肢体血流量,以促进骨折愈合。
　　2.接骨丹能够升高血钙和血磷,使钙磷乘积高峰显著升高,促进钙盐沉积,提高骨折愈合中血清碱性磷酸酶的活性,增强体内成骨活动,促进骨折愈合。
　　3.接骨丹可以调节外周血中骨生长因子的合成、分泌,促进骨形态发生蛋白、转化生长因子β、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子的表达，通过影响骨生长因子促进骨折愈合。
　　4.接骨丹能够提升骨痂最大载荷、挠度和刚度，促进骨生物力学性能的恢复，生物力学性能的增强可能与骨骼中胶原蛋白含量的增加有关。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

缩略词表

前言

实验一“接骨丹”对骨折模型家兔骨折愈合的影响

1材料及方法

2结果

3.讨论

实验二“接骨丹”在促进骨折愈合中对血生化指标的影响

1材料及方法

2结果

实验三“接骨丹”在促进骨折愈合中对骨生长因子的影响

1材料及方法

2结果

3讨论

实验四“接骨丹”在促进骨折愈合中对骨生物力学及Ⅰ型胶原蛋白的影响

1材料及方法

2结果

3讨论

结论与讨论

1骨折愈合过程

2骨折愈合影响因素

3促进骨折愈合的方法

4骨折愈合中医病因病机

5中医药促进骨折愈合的作用机制

6接骨丹文献研究

7本课题创新点

8问题与展望

9 结论

参考文献

文献综述:中医药促进骨折愈合的研究进展

致谢